粗茎鳞毛蕨绵马贯众素abba的提取及其抗肿瘤活性的研究生物学;植物学专业论文.docxVIP

Classified Classified Index： Code：10224 Confidential(yes／no)：no NO．120910739 Dissertation for the Master Degree Reseach on Antitumor Activity of Dryocrassin ABBA Treatment from Dryopteris crassirhizoma Candidate：Jin Zhe Supervisor：Professor Chang Ying Degree Category：Master of Science College：College of life science First level discipline：Biology Second level discipline：Botany Harbin China June 2015 万方数据 目 目 录 目 录 摘要 I 英文摘要 ．．I 1前言 ．．1 1．1间苯三酚化合物的研究进展 l 1．1．1间苯三酚化合物的结构及分类 ．1 1．1．2间苯三酚化合物的提取方法 ．1 1．1．3间苯三酚化合物的分离与纯化 ．3 1．1．4间苯三酚化合物的药理作用 ．．6 1．2抗肿瘤机制的研究进展 ～7 1．2．1肿瘤概述 7 1．2．2细胞凋亡定义及通路 ．8 1．2．3天然抗肿瘤药物研究进展 9 1．3粗茎鳞毛蕨的研究进展 ．．9 1．3．1粗茎鳞毛蕨的化学成分 ．．9 1．3．2粗茎鳞毛蕨的药理学研究 10 1．3．3绵马贯众素ABBA研究进展 11 1．4本研究的目的意义及技术路线 ．．1 l 1．4．1本研究的研究目的意义 11 1．4．2本研究的技术路线 13 2材料与方法 14 2．1试验材料 ．14 2．2主要试剂 ．14 2．3试验部分 。14 2．3．1总间苯三酚上样液的制备 14 2．3．2标准曲线绘制 ．．14 2．3．3静态吸附试验 15 2．3．4树脂的选择 l 5 2．3．5动态吸附与解析 16 2．3．6最佳浓度测定 16 2．3．7高效液相色谱分析 16 2．3．8液相色谱分析抗肿瘤有效成分 ．．17 2．3．9细胞培养与药物处理 17 2．3．10细胞活率检测 ．．18 2．3．1 l细胞凋亡检测 ．．1 8 2．3．12实时荧光定量PCR ．19 2．3．13免疫印迹检测凋亡蛋白 ．20 万方数据 东北农业大学理学硕士学位论文2．3．14小鼠肿瘤组织病理形态学检测 东北农业大学理学硕士学位论文 2．3．14小鼠肿瘤组织病理形态学检测 ．21 3结果与分析 22 3．1大孔吸附树脂的选择 22 3．2对静态吸附量及解吸率的考察 ．．22 3．3上样液浓度对动态吸附性能的影响 ．22 3．4动态吸附曲线的考察 23 3．5乙醇体积分数对洗脱率的影响 一23 3．6洗脱液流速对洗脱效果的影响 ．．24 3．7精制程度考察 25 3．8高效液相色谱分析 25 3．9间苯三酚类化合物对肿瘤细胞增殖的抑制作用 26 3．10绵马贯众素ABBA对肿瘤细胞增殖的抑制作用 ．27 3．11绵马贯众素ABBA对HepG2细胞凋亡率的影响 28 3．12实时荧光定量PCR检测相关凋亡基因的表达量 ．．29 3。13绵马贯众素ABBA对线粒体凋亡蛋白的作用 ．30 3．14小鼠肿瘤组织的病理形态学改变 31 zl讨论 ．．32 4．1粗茎鳞毛蕨间苯三酚类化合物的提取方法的比较 ．32 4．2粗茎鳞毛蕨间苯三酚类化合物的纯化方法的比较 ．32 4．3绵马贯众素ABBA抗肿瘤活性的初步研究 ．32 4．4绵马贯众素ABBA诱导HepG2细胞凋亡途径的研究 33 5结论 ．．35 致谢 36 参考文献 38 附录 42 攻读硕士学位期间发表的学术论文 ．43 II 万方数据 CONTENTSCoNTENTS CONTENTS CoNTENTS Abstract in Chinese ．．I Abstract in English I 1 Introduction ．．1 1．1 Research progress of phloroglucinols ．．1 1．1．1 Structure and categorization of phloroglucinols ．．1 1．1．2 Extraction methods of phloroglucinols ··I 1．1．3 Separation and purification of phloroglucinols 3 1．1．4 Pharmacological effect of phloroglucinols ．6 1．2 Research pr