血流感染实验室诊断新进展北京协和医院检验科.pptVIP

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2019-01-27 发布于浙江
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血流感染实验室诊断新进展北京协和医院检验科.ppt

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血培养阳性时间－金黄色葡萄球菌如何分析血培养凝固酶阴性葡萄球菌？ University Hospital of Base，2003－2007 3060阳性血培养，654CNS，粒缺患者除外 232 (35%)真正BSI，422 (65%)污染 BSI由感染科医生判断，至少一份血培养CNS阳性，有感染临床表现 SIRS: 体温38C or 36C; 心率90/min; 呼吸 20/min; 白细胞12 or 4 G/L or 10% 未成熟中性粒细胞 32%患者有1瓶以上CNS阳性，BSI68 %，污染12% (p 0.001) 没有SIRS症状：BSI 5%，污染29% (p 0.001) Clin Microbiol Infect. 2012 online 单瓶血培养CNS的BSI和污染患者区别 Clin Microbiol Infect. 2012 online 单瓶血培养CNS阳性BSI与临床症状相关性 Clin Microbiol Infect. 2012 online Clin Microbiol Infect. 2012 online 降低血培养污染率－－严格消毒血培养瓶消毒：70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞,待干60秒。或70%异丙醇消毒干燥皮肤消毒：三步法 70%酒精擦拭静脉穿刺点 30秒 1%?2%碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒：从穿刺点向外画圈消毒,直径3cm 70%酒精脱碘一步法葡萄糖酸洗必泰作用30 s，或70%异丙醇消毒后自然干燥，但不适用于2个月以内的新生儿。急诊血培养污染率与工作量相关 The University of Michigan Health System急诊血培养大多数由采血员采集，其次为护士和医生采血员:病人= 1:9，重症区护士:病人= 2:3，其它区域护士:病人=1:4 年病人量82521人，采集血培养者7586人 11.4%至少1瓶阳性，病原菌阳性率8.0%，污染率3.7% 多套培养患者阳性率7.4%，单套培养阳性率5.1%（p0.001），污染率无显著差别（2.2% vs. 2.6%） Schuyler Halverson, et al. JCM. 2013 online 急诊小时工作量 Schuyler Halverson, et al. JCM. 2013 online 繁忙时血培养污染率增加 OR=1.23 OR=0.93 Schuyler Halverson, et al. JCM. 2013 online 抗菌药物治疗与血流感染死亡率死亡率 Chest 115 (2): 1999 血培养三级报告制度血培养阳性终报告革兰染色传种培养初步报告 (直接药敏) 鉴定菌株电话报告鉴定＋标准药敏血培养结果回报对治疗的影响 A = Appropriate Therapy(正确治疗) I = Inappropriate Therapy(不正确治疗) Clin Infec Dis 24:584-602, 1997 血流感染快速分子诊断分子诊断不受抗菌药物使用的影响血培养阳性后分子诊断直接使用血标本进行分子诊断快速但不能提供药敏结果血培养阳性瓶分子鉴定 Antigone Kotsaki, et al. Expert Opin. Med. Diagn. 2012, 6(3):209 阳性血培养－基于PCR的检测 PCR特异性检测病原特异性PCR 特定耐药基因检测：葡萄球菌mecA, 肠球菌van 细菌载量：肺炎链球菌自溶毒A基因lytA拷贝数广谱检测：PCR扩增特定靶位多态性分析测序后续基因检测种特异性real-time PCR Expert Opin. Med. Diagn. 2012, 6(3):209. Curr Opin Infect Dis.?2011, 24(2):137 qPCR鉴定血培养阳性瓶中铜绿假单胞菌 Target：ecfX gene 血培养系统：BacT/ALERT，87瓶FA、13瓶FN，涂片均显示G-b 对照方法：氧化酶，API 20E DNA提取：0.5ml肉汤，离心后加裂解液，水煮法定量PCR：扩增：Oligonucleotide primers 基因特异性检测：fluorescent-labeled hybridization probes，152bp fragment Annal Clin Microbiol Antimicrob 2010, 9:21 qPCR鉴定血培养阳性瓶中铜绿假单胞菌 33瓶pae，敏感性和特异性均为100% 1瓶kpn+pae，由于pae (20CFU/ml)≤kpn (108CFU/ml)，PCR(-) 检测限：将ATCC27853 e