常见天然甾体衍生物对ugt1a4的抑制研究微生物与生化药学专业论文.docxVIP

目录一、摘要 目录 一、摘要 。1 (一)中文摘要 1 (二)Abstract ．3 二、正文 ． 。6 (一)前言 6 第一部分甾体皂苷及苷元类成分对UGTlA4的抑制 筛选p币边 (二)材料和方法 ．8 1．材料 8 2．方法 ．1 O (三)结果 ．14 1．代谢产物的制备及鉴定 ．14 2．甾体皂苷及苷元对UGTlA4的抑制筛选 ．1 7 3．甾体皂苷及苷元在UGTs重组单酶中抑制活性的选择性研究 ． ．． ．． ．． ． ． ． ． ． ． ． ．1 8 (四)讨论 ．19 第二部分UGTlA4介导的天然甾体皂苷及苷元类成 分的药药相互作用研究 (--)材料和方法 20 1．材料 ．20 2．方法 ．20 万方数据 (三)结果 (三)结果 ^ ．．22 1．甾体衍生物在混合人肝微粒中对UGTlA4的抑制IC50值测 定 ．．22 2．甾体衍生物在混合人肝微粒体中对UGTlA4代谢的抑制动 力学研究 ． ．．23 3．人肝微粒体中天然甾体衍生物对UGTlA4代谢的临床药物 IC50测定 28 4．人原代肝细胞中天然甾体衍生物与UGTlA4代谢的临床常 用药物之间的相互作用研究 28 (四)讨论 ．29 第三部分定量构效关系总结 (--)方法 30 1．方法 ．．30 (三)结果 ．32 1．甾体衍生物对UGTlA4代谢抑制的IC50．． 32 2．模型结果分析 34 3．CoMFA分析 36 4．CoMSIA分析 ．37 5．构效关系分析 ．38 (四)讨论 ．39 (五)结论 ．40 (六)参考文献 ．．41 万方数据 三、综述 三、综述 。45 (一)甾体皂苷研究进展和UGTs介导的药物．药物相互作用(DDI) 简介 ．．45 1．甾体皂苷简介 ．45 2．UGTs介导的药物药物相互作用(DDI)简介 49 (二)参考文献 ．53 四、攻读学位期间发表文章情况 ．．60 五、致谢 ．61 万方数据 大连医科大学硕士学位论文常见天然甾体衍生物对UGTlA4的抑制研究 大连医科大学硕士学位论文 常见天然甾体衍生物对UGTlA4的抑制研究 硕士生姓名：徐敏 指导教师：马骁驰教授 专业名称：微生物与生化药学 一、摘要 (一)中文摘要 目的：评价天然产物中常见甾体皂苷及其苷元类成分对葡萄糖醛酸转移酶1A4 (UGTlA4)的抑制效应，并确定其抑制活性在12种重组UGTs亚型中的选择 性；通过系统研究甾体皂苷及其苷元类成分对UGTlA4抑制动力学和抑制类型 进一步预测临床可能存在的药物．药物相互作用(DDI)；构建常见天然甾体皂苷 及苷元类成分结构与其对UGTlA4抑制活性之间的定量构效关系(3D．QSAR)， 为临床甾体皂苷与苷元类成分及富含该类成分的中药的合理用药提供指导。 方法：(1)体外试验：利用体外孵育体系，评价不同天然甾体皂苷及苷元类成分对 UGTlA4介导的三氟拉嗪葡萄糖醛酸化代谢的抑制活性；利用4．甲基伞形酮 (4．MU)作为UGTs的广谱底物，选取对UGTlA4活性较好的化合物进一步评 价其在12种人源的重组单酶中的抑制选择性。(2)系统分析甾体皂苷及其苷元 类成分对UGTlA4的抑制动力学，求算其抑制动力学参数，结合药代动力学参 数通过相关公式，推测其可能存在的DDI；在人的原代肝细胞中评价部分天然甾 体衍生物与UGTlA4催化代谢的临床常用药物的药物相互作用；(3)精确测定 43种甾体皂苷及其苷元类成分对UGTlA4的抑制IC50值，利用精确IC50和化合 物结构，构建比较分子场分析法(CoMFA)和比较分子相似性分析方法(CoMSIA) 模型，确定其结构与活性的定量构效关系(3D-QSAR)，为甾体及其皂苷类成分对 UGTlA4可能存在抑制作用进行预测提供了一种有效的手段。 结果： 本实验筛选的43个常见甾体皂苷及苷元中，37个化合物对UGTlA4具 有显著的抑制活性。其中，龙舌兰皂苷元(1)，吉托皂苷元(4)，剑麻皂苷元(5)， 澳洲茄胺(6)延龄草素(15)和纤细薯蓣皂苷(24)对UGTlA4表现出了特异 性的抑制作用，而对其它UGTs单酶几乎没有作用；而连糖的甾体皂苷如 prosapogenin A(19)，spongipregnoloside A(20)，pseudoprotodioscin(35)，YS—IX 万方数据 大连医科大学硕士学位论文(36)，pallidifloside 大连医科大学硕士学位论文 (36)，pallidifloside A(37)and pallidifloside H(38)对各种UGTs亚型都表现出了 轻微的抑制活性；通过考察薯蓣皂苷元(2)，鲁斯可皂苷元(3)，吉托皂苷元(4)， 剑麻皂苷元(5)，澳洲茄胺(6)和延龄草酸(15)对UGTlA4介导的