创伤性骨关节炎发病机理和初步防治的研究外科学骨外专业论文.docxVIP

譬-792972声 譬-792972 声 明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含 其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川大学或其他教育机 构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡 献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 本学位论文成果是本人在四川大学读书期间在导师指导下取得的，论文成 果归四川大学所有，特此声明。 螨儿即叫 指导教师：t多铹 四川大学临床医学博士专业学位论文创伤性骨关节炎发病机理和初步防治的研究 四川大学临床医学博士专业学位论文 创伤性骨关节炎发病机理和初步防治的研究 研究生： 邵世坤 导师：装福兴教授 中文摘要 目的： (1)建立股骨内侧髁不同软骨损伤的实验动物模型，观察不同损 伤后关节软骨病理学及生物力学的影响及创伤性骨关节炎的发病机理。 (2)初步探讨关节腔内注射透明质酸钠对关节软骨损伤继发的创 伤性骨关节炎的防治作用。 材料与方法： (1)采用自由落体方法，在体内建立由高(6．3J)、低(0．9J)能 量撞击造成的兔股骨内侧髁关节软骨不同损伤模型。 (2)选用56只健康成年新西兰大白兔，随机分配到高(6．3J)、低 (0．9J)能量撞击组，每组28只，一侧为实验组，另一侧为对照组，术 后随机分为4天、1周、2周、4周、8周、16周、32周七个组，每个时 间组4只动物。每时间组观察期满后取材，采用HE染色、TUNEL法、 扫描电镜、透射电镜、番红0染色、Ⅱ胶原免疫组化、II型胶原mRNA 原位杂交染色、探针法测定和压凹法测定等方法分别观察不同能量造成 关节软骨损伤后软骨细胞凋亡、基质蛋白多糖含量、基质II型胶原含量、 软骨Ⅱ型胶原mRNA原位杂交染色阳性细胞率和生物力学的变化。 (3)10只健康成年新西兰白兔，双侧均行高能量(6．3J)撞击股 骨内侧髁，左侧关节腔内注射透明质酸钠为实验组，右侧关节腔内注射 四川大学临床医学博士专业学位论文生理盐水做为对照组。每周注射一次，共注射5次。于最后注射时间4 四川大学临床医学博士专业学位论文 生理盐水做为对照组。每周注射一次，共注射5次。于最后注射时间4 周后处死动物，取材。用HE染色、TUNEL法、番红0染色、Ⅱ胶原免 疫组化、Ⅱ型胶原mRNA原位杂交染色等方法分别观察软骨细胞的凋亡、 基质中蛋白多糖含量、基质中Ⅱ型胶原含量及代谢。 结果： (1)高能量(6．3J)撞击后HE染色病理切片观察，软骨出现裂隙， 但未涉及钙化层与软骨下骨，扫描电镜观察，在移形层和辐射层均发现 有胶原网架变形并有断裂。低能量(O．9J)软骨无裂隙，细胞层次结构 清晰，钙化层紧贴软骨下骨板未见骨折。扫描电镜观察，软骨胶原纤维 网架完好，未见变形及断裂。 (2)轻、重组在伤后早期软骨细胞凋亡率明显高于对照组，并具有 显著性差异。低能量组中，伤后4周软骨细胞凋亡率恢复到对照组水平。 高能量组软骨细胞凋亡率仍逐渐增高，细胞凋亡率与对照组有显著性差 异。 (3)结合HE染色与番红O染色结果，低能量组的Martkin评分与 对照组标本无显著性差异；高能量组Mankin评分始终较高，与对照组 有显著性差异，且Mankin评分呈逐步上升。 (4)低能量组中，伤后早期软骨细胞II型胶原mRNA阳性细胞率 增高与对照组有显著性差异。2周后恢复到对照组水平。高能量组中，4 天、1、2周的标本软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA阳性细胞率增高与对照组 有显著性差异，4周的标本软骨细胞II型胶原mRNA阳性细胞率阳性细 胞率下降，随伤后时间越长，软骨细胞陷窝模糊，阳性细胞率越低，与 对照组有显著性差异。 (5)低能量组中，Ⅱ型胶原标本着色及基质目标灰度值与对照组无明 显差异。高能量组中，4天、1周、2周组软骨基质II型胶原目标灰度值 四川大学临床医学博士专业学位论文与对照组无明显差异；4周后软骨基质Ⅱ型胶原目标灰度值与对照组有 四川大学临床医学博士专业学位论文 与对照组无明显差异；4周后软骨基质Ⅱ型胶原目标灰度值与对照组有 显著性差异。 (6)低能量组软骨厚度与对照组相比无明显差异。高能量组4天时 软骨厚度就有明显增厚，以后软骨厚度持续上升，4周时达高峰，随后 软骨厚度迅速下降，32周时最低。 (7)低能量组中，4天、1周、2周的软骨瞬时剪切模量、平均剪 切模量与对照组相比，均有轻度降低，但无显著性差异。以后软骨瞬时 剪切模量、平均剪切模量逐渐恢复到正常范围。高能量组中，4天、1、 2周时软骨瞬时剪切模量、平均剪切模量均有轻度降低，但无显著性差 异。从撞击伤后4周开始，软骨瞬时剪切模量持续迅速下降，8周开始， 软骨平均剪切模量也随之迅速下降，且程度相似，32周时最低。 (8)低能量