葛根素八肽胆囊收缩素逆转糖尿病性白内障形成及其机制初探病理学与病理生理学专业论文.docxVIP

中文摘要葛根素、八肽胆囊收缩素逆转糖尿病性 中文摘要 葛根素、八肽胆囊收缩素逆转糖尿病性 白内障形成及其机制初探 摘 要 糖尿病是一种全球范围内的严重危害人类健康的常见内分泌代 谢性疾病。糖尿病以高血糖为主要特征，可影响人体多脏器和多系统 而引起多种并发症如心、脑、肾、眼、周围血管、神经病变的发生， 其并发症是导致糖尿病致残率和病死率升高的主要原因。在眼部，糖 尿病性白内障与糖尿病视网膜病变是糖尿病的常见并发症，而糖尿病 性白内障是首要的致盲因素。因此，对糖尿病性白内障进行深入研究， 具有重要的现实意义。 对糖尿病性白内障发生机制的研究已取得了明显进展，揭示主要 的发病途径有，糖代谢异常通路(醛糖还原酶)学说和氧化应激(非 酶性糖基化反应)学说。其中，氧化应激学说近年来受到国内外眼科 学者的关注并为医学界公认。传统氧自由基氧化应激损伤机制强调了 过氧化氢(hydrogen peroxide，H202)、一氧化氮(ni仃ic oxide，NO)和 超氧阴离子(superoxide anion，02-‘)等自由基的氧化作用：而新的理 论指出，NO与02-大量诱生产生的过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite， ON00一)及其衍生物具有更强的氧化作用。目前国内外尚未见有关 ON00一途径致晶状体氧化损伤的报道。NO是一种具有多向性调节作 用的新颖的信使分子，诱导性一氧化氮合酶(inducible ni仃ic oxide synthase，iNOS)则是NO生成的主要限速酶。NO可以通过衍生多种 强氧化物如饼叮00一，启动氧化应激。已有报道，NO过量生成时在 视网膜损伤中发挥重要作用。新近发现，在人、鼠、兔晶状体中有 NO生成。然而，迄今为止iNOS和NO以及ON00一在糖尿病性白内 障发生过程中的变化尚不清楚。新近研究揭示，葛根素(puerarin)有明 显的抗氧化能力，可降低糖尿病血糖浓度，但葛根素对糖尿病并发症 糖尿病性白内障是否也具有治疗功效，如果有效，其作用机制及与 iNOS、NO和ON00一的关系均无报道。八肽胆囊收缩素 (cholecystokinin octapeptide．8，CCK．8)既是胃肠道激素又是神经肽， 中文摘要广泛分布于胃肠道和中枢神经等系统，具有多种生理作用。本室既往 中文摘要 广泛分布于胃肠道和中枢神经等系统，具有多种生理作用。本室既往 的研究检测到在大鼠肺脏等器官中有CCK-8的表达并且CCK一8可对 肺组织等起保护作用。那么，CCK一8对晶状体上皮细胞(1ens epithelium cell，LEC)是否也具有保护作用? 本研究建立了糖尿病性大鼠白内障动物模型及离体白内障模型， 在整体、器官及细胞分子水平研究了ONOO一在白内障发病过程中的 作用，并探讨葛根素与CCK．8的对抗作用，为临床进一步揭示氧化 应激损伤在白内障发生和发展中的作用机制，为白内障的防治提供新 的理论与实验依据。 1建立大鼠糖尿病及大鼠糖尿病性白内障动物模型 将健康无热原Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠72只均分为对照 组、链脲佐菌素(sⅡeptozotocin，STZ)组。使用STZ(45mg／kg w) 腹腔注射制作大鼠糖尿病及大鼠糖尿病性白内障动物模型。3d后自 大鼠尾静脉取血测血糖，血糖16mmol／L以上为糖尿病动物模型复制 成功并纳入大鼠糖尿病性白内障动物模型实验组(STZ组)。与此同 时，对照组和STz组每日腹腔注射等量生理盐水。定期观察两组大 鼠全身情况及体重、血糖变化并进行眼部常规检查，分为20、40、 60d三个观察时相。实验结果显示，腹腔注射STZ 20d至60d，大鼠 血糖含量明显升高，体重减轻以及大鼠出现食多、口渴、消瘦、乏 力、尿多、毛发干枯等糖尿病的典型表现；同时，晶状体出现不同 程度病变，20d时晶状体周边皮质出现密集空泡、部分皮质片状混浊， 40d时晶状体核及核周皮质混浊，60d时晶状体核及核周皮质出现混 浊、甚至部分晶状体完全混浊。荧光显微镜检查，对照组细胞核呈 黄绿色荧光，细胞浆呈绿色荧光，为正常细胞的荧光表现：在实验 20 d至60d期问，STZ组LEC细胞核颜色逐渐由黄绿色荧光转变为 橘黄和橘红色荧光，细胞浆绿色荧光逐渐变淡，说明正常的LEC受 到破坏但尚处于凋亡阶段而未出现细胞坏死的红色荧光。光镜检查， STZ组大鼠LEC的细胞形态发生病理改变。20d时，部分LEC由正 常的立方形变为长形或类圆形；40、60d时，STZ组细胞形态变形加 重，细胞体积缩小，胞浆色深，胞核致密、浓缩，呈深紫色，赤道部 皮质出现大量特征性空泡性改变。透射电镜检查，STZ组LEC呈异 中文摘要常改变且病变逐渐加重，表现为细胞间隙增宽，细胞浆内可见大小 中文摘要 常改变且病变逐渐