多聚物1免疫的青光眼模型大鼠视网膜中小胶质巨噬细胞的活化眼科学专业论文.docxVIP

复 旦 复 旦 大 学 硕 土生 毕业 论 文 中 文 摘 要 多 聚 物 -1 免 疫 的青 光 眼模 型 大 鼠视 网膜 中 小 胶 质 /巨噬 细 胞 的活 化 摘 要 大量研究证明，多聚物-1 (C opolym er-1,C op-1) 可启动机体的保护性 自身免疫反 应 ，对 中枢神经系统和视神经具有保护作用 。在青光眼模型 中，C op-1 可启动 T 细胞 介 导 的保 护 性 自身 免 疫 反 应 ，对 青 光 眼 造 成 的视 神 经 损 伤 具 有 保 护 作 用 。但 是 保 护 性 自身免疫反应比较复杂，T 细胞的活化可能仅仅是反应的第一步。我们借鉴今枢祌经 系统中 C op-1 反应性 T 细胞可 以进一步激活小胶质细胞 ，发挥神经保护作用的机制， 推 测 青 光 眼 模 型 中 T 细 胞 活 化 后 也 也 可 以进 一 步 活 化 视 网膜 中 的 小 胶 质 细 胞 ，发 挥 视 神 经 保 护 效 用 。 本实验通过将 C op-1 免疫于青光眼模型大 鼠诱导 自身免疫 反应 ，观察视 网膜 中小 胶质/巨噬细胞 的表 达和活 化 ，分析 C op-1 反应性 T 细胞 （T cop-1)、R G C s 存活与小 胶 细 胞 相 互 关 系 ，并 初 步 探 索 小胶 质 细 胞 发 挥 作 用 的 可 能 机 制 。 我们发现 ：C op-1 免疫后可 引起青光眼模型大 鼠视 网膜 中小胶质/巨噬细胞 的聚集 和活化 ，活化 的小胶质/巨噬细胞对 R G C s 具有保护作用 。T cop-1 参与 了小胶 质细胞 的活化 ，而 非 C op-1 本 身直接作 用 。活化 的小胶 质 细 胞 可 以分泌 一 系列 细 胞 因子 T N F -ou B D N F 、IL -10 ， 可 能 是 小 胶 质 细 胞 发 挥 视 神 经 保 护 作 用 的机 制 之 一 。 第 一 部 分 C op-1 免疫正常大 鼠视 网膜 中小胶质/巨噬细胞及 R G C s 存活 的变化 目的 ：观 察 并研 究 多聚物-1 (C op-1) 免疫 的正常 大 鼠视 网膜 中小胶质/巨噬 细胞 的形 态 学 和 数 量 变 化 以及 R G C s 存 活 的情 况 。 方 法 ： 随 机 对 照 实 验 。4 8 只 正 常 眼 压 雌 性 W istar 大 鼠 ，随 机 分 为 两 组 ， 分 别 为 ： 24 只给予 C op-1 免疫 （C op-1 组 ），24 只给予 P B S 免疫 （P B S 组 ）。另取 4 只正常 W istar 大 鼠不予任何处理 ，作 为空 白对 照组 。后肢足垫给 予 C op-1 或 者 P B S 免疫 。分别于 免 疫 后 3d 、7 d 、 10d 、 17 d 、24 d 、3 1d , 制 作 视 网膜 冰 冻 切 片 ，免 疫 组 化 法 观 察 视 网 膜 中 小 胶 质 /巨 噬 细 胞 的 形 态 和 分 布 ， 并 进 行 细 胞 计 数 。分 别 于 免 疫 后 3d 、 10d 、2 4 d 、 3 丨d , 通 过 荧 光 金 上 丘 注 射 的 方 法 逆 标 视 网膜 中 的 R G C s, 7d 后 制 作 视 网膜 铺 片 ，显 1 复 复 旦 大 学 硕 士 生 毕 业 论 文 中 文 摘 要 微 镜 下 观 察 R G C s 存 活 情 况 ， 并 进 行 细 胞 计 数 。 统 计 采 用 随 机 区 组 设 计 t 检 验 或 近 似 t 检 验 。 结 果 ：免 疫 组 化 结 果 显 示 ：两 组 均 存 在 小 胶 质 /巨噬 细 胞 的 活 化 ，但 较 P B S 组 ， C op-1 免疫组有更多 的小胶质细胞被活化 ，在 3d 、7d 、10d 、17d 、24d 小胶质/巨噬细 胞 计 数 分 别 为 43.14±9 .27/m m 2, 34 .35±4 .35/m m 2, 38.2 5±9.53/m m 2, 23.11士5.16/m m 2 和 24 .94±3.82/m m 2，较 对照组有 统计 学差异 （各 组 P 0.0 5 )。R G C s 逆标 结果显 示 ： 在观察 的各 个 时 间 点 ，C op-1 免疫组 的平均 R G C s 存 活数 量均较 P B S 组增 多 ，在 24d 的时候 C op-1 免疫组 R G C s 存活数量为 2583.61±339.70/m m 2,较 PB S 组具有统计学差 异 （P = 0 .0 19 8 ) 。 结论 ：C op-1 免 疫正常大 鼠后视 网膜 中存在 小胶质/巨噬细胞 的聚集和活