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传染性皮下和造血器官坏死病IHHN.DOC
附件8
传染性皮下和造血器官坏死病(IHHN)监测计划
一、监测点设置
监测点应包括辖区内的所有对虾国家级和省级原良种场,从常规测报点中选择的中国对虾、南美白对虾等的重点苗种场,近两年内出现过IHHN阳性结果的养殖场。具体监测品种和监测点的选择由承担任务的省(区、市)根据本地情况自行确定。监测点应填写《监测点备案表》(附件11—5)。
二、采样条件
重点在亲虾入场前后以及育苗季节采样。
三、采样数量和方法
采集样品分亲虾、虾苗(包括虾卵)和养成期对虾。每份样品应采集活虾150尾,优先选择有死亡情况发生的虾苗;如果有条件可以采集组织,大于3cm的样品可只取头胸部,大于6cm的样品可只取鳃或包含胃的头胸前部。采样要按照《水生动物产地检疫采样技术规范》的要求进行,并填写《现场采样记录表》(附件11—6)。
四、样品包装和运输
样品的包装和运输以不泄漏、不交叉污染,保证样品中核酸不发生降解为基本原则。包装内的《现场采样记录表》要用聚乙烯袋防水。
空运样品,包装应符合《水产品航空运输包装通用要求》(GB/T 26544-2011)要求。陆运或自检活体样品,应用聚氯乙烯贴布革水产袋,充氧、降温运输。
运输冰冻样品和难以活体或冰冻状态保存的样品,其包装要符合《白斑综合征(WSD)诊断规程第4部分:组织病理学诊断法》(GB/T 28630.4-2012)中附录B的要求。即:对于冰冻样品,运输前应将各样品独立装袋,连同标签密封,再集中套袋,在泡沫箱中用足量的冰、冰袋或干冰将样品塑料袋埋入,进行合适的包装后运输到实验室;或用干冰或用低于-20℃的冰柜速冻,将标签放入独立的样品包装袋,用足量的干冰将样品包装袋埋入泡沫塑料箱中,进行合适的包装后再运输。对于难以冰冻状态保存的样品,可用3倍体积90%~95%的乙醇保存运送。小于2g的个体,可直接保存于3倍体积90%~95%的乙醇中;较大的个体,采样时应适当切割或取病灶组织保存在3倍体积90%~95%的乙醇中。至少在交付运输前的1小时,将保存的样品转移到50%乙醇中;不能带液体运输时,用浸润50%乙醇的吸水纸多层包裹样品,再独立密封到小塑料袋或密封的塑料离心管中,做好标签,多个塑料袋外裹多层吸水纸,再套入更大的塑料袋密封,装箱运输。
样品采集前和采集完成后均需及时与检测单位联系,确保样品的顺利交接。
五、检测方法
《对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)检测 PCR法》(GB/T 25878-2010)。
六、检测结果报告
各检测单位,要在接到样品后2周内完成检测程序,并提交《检测报告》,报告中应包括样品描述等流行病学调查信息。检测结果为阳性或疑似阳性的,需进行PCR扩增产物测序,同时提交PCR测序结果电子版,并保存样品。如检测单位不具备测序条件,将阳性样品送参考实验室进行测序。
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