神经保护剂对脑缺血后一氧化氮的影响临床医学急诊专业论文.docxVIP

南京医科大学硕士学位论文神经保护剂对脑缺血后一氧化氮的影响 南京医科大学硕士学位论文 神经保护剂对脑缺血后一氧化氮的影响 南京医科大学第一附属医院急诊中心 研究生：何斌 导师：张劲松 肖 杭 指导小组：徐鑫荣 高 蓉 (南京21 0029) 摘要 第一部分：线栓法制大鼠中动脉闭塞模型的建立和改良 研究线栓法制大鼠中动脉闭塞(MCAO)模型，对操作步骤和评价 标准进行改良，以提高造模的成功率和评价的准确率。 以合适的栓线从大鼠颈外动脉插入大脑中动脉，阻断大脑中动脉 的血供，造成相应的脑区缺血梗死。术后24h取脑，切片，以红四氮 唑(TTC)染色评价造模是否成功。在上述基础上改进栓线制作和手 术操作，比较常规法和改良法造模的成功率。同时观察并记录所有手 术大鼠的体征表现，以TTC染色结果为金标准，评价各体征指标反 映造模结果的准确性。 脑片经TTC染色后，正常组织呈红色，缺血梗死组织呈白色， 南京医科大学硕士学位论文相邻脑片有大片白色区域者，为造模成功。根据TTC染色结果，改 南京医科大学硕士学位论文 相邻脑片有大片白色区域者，为造模成功。根据TTC染色结果，改 良法造模成功率为71．67％，明显高于常规法的52．O％；评价模型是否 成功，用体征指标灵敏度较高，但特异度很低。 我们已成功建立大鼠MCAO模型，并在原有的基础进行改进，改 良法*-Jv：Z有效的提高MCA0模型的成功率。MCAO模型的个别体征指 标，由于特异度低，提高了假阳性率，我们建议将其舍弃。 第二部分：大鼠脑缺血后一氧化氮的变化， 以及药物(神经节苷脂和尼莫地平)的影响 观察缺血脑组织中神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧 化氮合酶(iNOS)和一氧化氮(NO)的变化，探讨神经节苷脂和尼莫 地平对其的影响，以及可能的脑保护作用。 以线栓法制大鼠脑缺血模型，观察缺血后30min、2h、6h和24h 脑中NO含量、nNOS活性和iNOS活性的变化。分别研究神经节苷 脂对iNOS活性、尼莫地平对nNOS活性的影响，以及它们发挥的脑 保护作用。 本试验结果显示，脑缺血后30min nNOS活性升高，随后下降； iNOS活性24h明显升高；NO含量分别于30min和24h升高。神经 节苷脂和尼莫地平可分别抑制脑缺血后iNOS和nNOS活性上升，并 减轻脑缺血损伤。 脑缺血后nNOS和iNOS活性升高，将介导产生大量NO损伤脑 南京医科大学硕士学位论文组织，抑制其活性升高可减轻脑损伤。 南京医科大学硕士学位论文 组织，抑制其活性升高可减轻脑损伤。 关键词：动物模型脑缺血大鼠一氧化氮神经元型一氧化氮合酶 诱导型一氧化氮合成酶尼莫地平神经节苷脂 The effect of NeuroprotectiVe drugs on nitro oxide after cerebral ischemia Department of Emergency,the First Affiliated hospital of Nanj in Medical University Postgraduate He Bin Supervisor Zhang Jin—song Xiao Hang ABSTRACT Part 1：Establishment and improvement of the middle cerebral artery(MCA)occlusion model To establish the MCA occlusion model and upgrade its operation and evaluation． We choked the MCA of rat by a suitable strand to cause infarct in corresponding encephalic regions，and then removed brain and sliced at 南京医科大学硕士学位论文24h 南京医科大学硕士学位论文 24h after ischemia．Brain slices were drained by TTC to judge if the models were successful．We upgraded operation and the strand to improve the achievement of model．Objective signs of all rats were recorded to be compared with the results of TTC stained． Injury regions were white and normal regions were ret after TTC stain