色素的提取和分离实验原理、材料.pptVIP

光合色素的提取和分离 ▲ 实验原理 提取 —— 色素不溶于水，溶于有机溶剂（乙醇、丙酮等） 分离 —— 色素在层析液中的溶解度不同。 ▲ 实验目的 1. 色素的提取和分离。 2．验证叶绿体中色素的种类和各种色素的颜色。 纸层析法 溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；反之则慢。 ▲ 分离方法 实验步骤 ▲ 实验步骤（见实验册P32） 提取色素 → 制备滤纸条 → 画滤液细线 → 分离色素 → 观察记录 实验步骤 1. 提取叶绿素 研磨、匀浆 过滤 提取液 称取5克的菠菜緑叶，剪碎，放入研钵中。 加入少许二氧化硅和碳酸钙，再加入3mL无水乙醇。 —— 新鲜、颜色深绿的叶片（成功关键1） 研磨充分 ▲ 过量易使滤液颜色变浅 中和有机酸，防止色素被破坏 ☆ 各试剂作用 SiO2 —— CaCO3 —— 95%的乙醇 （丙酮、石油醚） —— 溶解色素 ▲ 不加入则会发生去镁反应，叶绿素分子成为 褐色的去镁叶绿素，滤液呈黄绿色或褐色 ▲ 不加入则色素不能溶解，滤液几乎无色 ☆ 研磨的要求 ☆ 收集滤液的要求 —— 迅速、充分（成功关键2） 有机溶剂易挥发 充分破坏叶绿体，使色素完全释放 —— 及时塞紧试管口，防止挥发 （成功关键3） 2. 制备滤纸条 ☆ 制备要求 —— 使色素扩散均匀，色素带整齐 —— 标记作用 将一端剪去两角 在距此端1cm处画一铅笔横线 不要弄脏弄湿滤纸条 用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀画出一条直的滤液细线。重复3-4次。 1cm 滤液细线 3. 画滤液细线 —— 防止色素带重叠，使扩散起点一致 —— 增加色素含量，使效果更明显 细、直、均匀 重复2～3次（干后再画） ☆ 画线要求（成功关键4） 分离色素 3mL层析液 → 小烧杯 → 滤纸条 插入层析液中（滤液细线一端朝 下）→用培养皿盖住烧杯口 ☆ 操作要求 （色素会溶于层析液中） （防止挥发） （成功关键5） 滤液细线不能接触层析液 盖住烧杯口 胡萝卜素（扩散速度最快，色素带最窄） 叶黄素 叶绿素a（色素带最宽） 叶绿素b（扩散速度最慢） ▲ 实验结果 扩散速度快慢与（ ）有关 色素带的宽窄与（ ）有关 溶解度高低 色素含量多少 绿叶中的色素 叶绿素 类胡萝卜素 叶绿素a 约占总量的3/4 约占总量的1/4 呈蓝绿色 叶绿素b 呈黄绿色 胡萝卜素 呈橙黄色 叶黄素 呈黄色 吸收红光、蓝紫光 吸收蓝紫光 实验相关知识： 一、绿叶中的色素种类及生理作用：