二维核磁共振谱精简2.pptVIP

63 二维核磁共振时间轴预备期→发展期→混合期→检出期 预备期：预备期在时间轴上通常是一个较长的时期，它使实验前的体系能回复到平衡状态。 发展期（t1）：在t1开始时由一个脉冲或几个脉冲使体系激发，使之处于非平衡状态。发展期的时间t1是变化的。 混合期（tm）：在这个时期建立信号检出的条件。混合期有可能不存在，它不是必不可少的（视二维谱的种类而定）。 检出期（t2）：在检出期内以通常方式检出FID 信号。 二维谱的分类 J分解谱 J Resolved Spectroscopy, d-J 谱 同核 (homonuclear), 异核(heteronuclear) 化学位移相关谱 Chemical Shift Correlation Spectroscopy, d- d 谱 同核偶合, 异核偶合, NOE 和化学交换 多量子谱 Multiple Quantum Spectroscopy 二维谱的表现方式 J分解谱 2 D C-H J分解谱 异核位移相关谱 异核位移相关谱 C-H COSY 是13C 和1H 核之间的位移相关谱。它反映了13C和1H 核之间的关系。它又分为直接相关谱和远程相关谱，直接相关谱是把直接相连的13C 和1H 核关联起来，没有对角峰，矩形中出现的峰称皆为相关峰或交叉峰。每个相关峰把直接相连的碳谱谱线和氢谱峰组关联起来。 季碳原子因不连氢而没有相关峰。如一碳原子上连有两个化学位移值不等的氢核，则该碳谱谱线对着两个相关峰。因此，这样的碳一定是CH2。 H,C-COSY结合氢谱的积分值，每个碳原子的级数（CH3，CH2，CH，C）都能确定。 远程相关谱是将相隔两至四根化学键的13C 和1H 核关联起来，甚至能跨越季碳、杂原子等，交叉峰或相关峰比直接相关谱中多得多，因而对于帮助推测和确定化合物的结构非常有用。 异核位移相关谱---------测试技术上有两种方法 对异核（非氢核）进行采样，这在以前是常用的方法，是正相实验，所测得的图谱称为“C，H COSY”或长程“C，H COSY”、COLOC。因是对异核进行采样，故灵敏度低，要想得到较好的信噪比必须加入较多的样品，累加较长的时间。 对氢核进行采样，这种方法是目前常用的方法，为反相实验，所得的图谱为HMQC、HSQC或HMBC谱。由于是对氢核采样，故对减少样品用量和缩短累加时间很有效果。 HMQC、HSQC反映的是 1JCH耦合， HMBC谱和COLOC则对应于长程耦合nJCH 。 NOE类二维核磁共振谱（Homonuclear Shift Correlation Spectroscopy） NOESY 二维NOE(Nuclear Overhauser effect spectroscopy) NOESY 和ROESY 二维 NOE 谱简称为 NOESY，它反映了有机化合物结构中核与核之间空间距离的关系，而与二者间相距多少根化学键无关。因此对确定有机化合物结构、构型和构象以及生物大分子（如蛋白质分子在溶液中的二级结构等）有着重要意义。 NOESY 的谱图与1H-1H COSY 非常相似，它的 F2维和 F1维上的投影均是氢谱，也有对角峰和交叉峰，图谱解析的方法也和 COSY 相同，唯一不同的是图中的交叉峰并非表示两个氢核之间有耦合关系，而是表示两个氢核之间的空间位置接近。 由于 NOESY 实验是由 COSY 实验发展而来为的，因此在图谱中往往出现 COSY 峰，即 J偶合交叉峰，故在解析时需对照它的1H-1H COSY 谱将J 偶合交叉峰扣除。在相敏 NOESY 谱图中交叉峰有正峰和负峰，分别表示正的 NOE 和负的 NOE。 当遇到中等大小的分子时（分子量约为 1000-3000），由于此时 NOE 的增益约为零，无法测到NOESY 谱中的相关峰（交叉峰），此时测定旋转坐标系中的 NOESY 则是一种理想的解决方法，这种方法称为 ROESY（ Rotating frame Overhause Effect Spectroscopy），由此测得的图谱称为 ROESY谱。 ROESY 谱的解析方法与 NOESY 相似，同样 ROESY 谱中的交叉峰并不全都表示空间相邻的关系，有一部分则是反映了耦合关系，因此在解谱时需注意。 总相关谱（Total Correlation Spectroscopy, TOCSY） TOCSY把COSY的作用延伸，从任一氢的峰组可以找到与该氢核在同一耦合体系的所有氢核的相关峰。 TOCSY的外型与COSY相似，但交叉峰的数目大大增加。 2D INADEQUATE的2种形式 核磁共振谱图综合解析 识别氢谱与碳谱中的溶剂峰与杂质