徐汉荣改进的植物细胞有丝分裂试验.doc

改进的植物细胞有丝分裂实验 徐汉荣 摘要：实验前10天左右，从市场上大蒜的鳞茎作为植物细胞有丝分裂的实验材料，放置在实验室避光、通风、干燥的地方3-5天。去除老化的皮和根等后用牙签串起，基部放入广口瓶中培养根尖，每天换水不少于3次。如果是秋天季节，当根尖长到1cm左右时，在下午2点钟左右取材，这时气温较高，细胞分裂比较旺盛。可用卡诺固定液固定，用75%的酒精保存。实验前，用清水冲洗固定液后，可用15%的盐酸解离10分钟左右，后用清水漂洗1-2min。用新配制的1%的醋酸洋红进行染色（配制时醋酸分步加入，使洋红充分溶解）。将漂洗后的根尖放在载玻片上，用刀片切去根冠（有点透明），再用刀片切去根尖上部，保留根尖生长点（白色部分）1-2mm，用刀片对其2次纵切，一分为四，向根尖滴加1滴染液，染色1-2min.略倾斜玻片，露出根尖后用吸水纸从一侧吸掉多余的染液。用带橡皮头的铅笔进行敲击，能很好地控制压片。这样，你在一个视野中找到3-5个分裂期的细胞就不足为奇了。 关键词：改进 有丝分裂 1问题提出 1.1本研究是开展植物细胞有丝分裂实验的需要 植物细胞有丝分裂实验是上海二期课改高中生命科学（试用本）的学生实验，也是高中生命科学学业水平考试实验内容之一。我们可以通过自制的显微装片，观察到植物细胞有丝分裂各个时期的细胞，从而帮助我们理解植物细胞有丝分裂各个时期的染色体变化及细胞特征。同时，通过实验使我们学会植物细胞有丝分裂装片制作过程中的取材、解离、漂洗、染色、压片和镜检等技术。另外，教材介绍的是植物细胞有丝分裂实验的一般方法，为取得更好的实验效果，我们可以对实验的各个环节开展探究。 1.2本研究是提高植物细胞有丝分裂实验效果的需要 尽管在课前要求学生对实验内容进行了预习，老师也为学生提供了已经解离并经过漂洗的根尖，学生也严格按照教材的要求，在老师的指导下进行实验操作，但是实验效果并不理想。通过对以往同学的调查发现：大部分同学只看到间期细胞，只有极少的同学看到处于分裂期的细胞，还有部分同学表示实验现象很不明显。同时，我们对区域生命科学教师进行了调查，发现这些学校也存在类似的情况，只要求学生学会实验操作的一般方法，对于实验结果主要借助于现成的装片，或者教师做好的装片让学生进行观察。到学业水平考试时，通过购买根尖材料和配制好的试剂来完成实验考试。如何切实提高实验效果，是实验改进的首要任务。 1.3本研究是探索植物细胞有丝分裂实验研究的需要 通过文献研究不难发现：对植物细胞有丝分裂的研究，存在国外多国内少，对实验材料选择的研究多对实验进行系统改良的研究少；教师研究的多学生探究的少等特点。如何从每一步的实验原理着手，系统改进植物细胞的有丝分裂实验，是提高实验效果的关键所在。 2实验准备 2.1查阅资料 我们对《生物学通报》、《中学生物学》、《中学生物教学》三本权威相关国内刊物，近几年对植物细胞有丝分裂的文章，进行了分类整理，为实验设计提供思路。 2.2实验原理 细胞分裂旺盛则分裂相的细胞数目多，碱性染料能使染色剂染色，解离后易使细胞分散并被压成一层细胞。 2.3实验材料 大蒜根尖（本实验选择上海市民常吃的大蒜鳞茎培养的根尖，一般从菜场购买） 2.4实验试剂和仪器设备 试剂：染液（盐酸、醋酸洋红）、卡诺固定液、盐酸、75%酒精 仪器设备：显微镜、培养皿、广口瓶、载玻片、盖玻片、刀片、烧杯 2.5实验一般步骤 实验的一般步骤是：培养根尖→取材→固定→冲洗→解离→漂洗→染色→压片→镜检。 2.5.1培养根尖 图1 购买大蒜鳞茎 图2 去处老化的皮 图3 去除基部老化的根 将从市场购得的大蒜鳞茎，大多经过贮藏保鲜处理，需放置于避光、通风、干燥的自然环境中3-5天，更加有利于培养根尖。实验前3-4天，去除老化的皮和根。用牙签串起，基部放在广口瓶的水中。由于切口会分泌大量粘液进入水中，会影响生根，所以，勤换水是生根的关键，要求至少每天换水3次。 2.5.2取材 当根长到约1-3cm时，用刀片将上述根尖从根基部切下3mm长的根尖。一般在分裂高峰期时取材观察效果更好。 2.5.3固定 用镊子将根尖放入卡诺固定液中固定1-2小时，取出放入75%酒精中保存备用。如果是当天要做的实验，则没有必要固定处理。 2.5.4冲洗 用镊子把大蒜根尖从固定液中取出，用清水冲洗干净。 2.5.5解离 将其放入20%的盐酸解离液中浸约8-10分钟，解离目的是使根尖组织细胞易于分散。 2.5.6漂洗 将解离后的根尖转入用纱布盖住的小烧杯或培养皿中，用细小的水流漂洗根尖3-5分钟。 2.5.7染色 将漂洗后的根尖放在载玻片上，用刀片切去根冠（有点透明），再用刀片切去根尖上部，保留根尖生长点（白色部分）1-2mm，用刀片对其2次纵切，一分