氯化钴对甲状腺乳头状癌NPA细胞上皮间质转化的影响及其机制.docVIP

氯化钴对甲状腺乳头状癌NPA细胞上皮间质转化的影响及其机制 贾朝莉，龙方懿，刘智敏，杨俊艳，刘小花，董超然，王 妮（400016重庆，重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室，分子医学与肿瘤研究中心） [摘要] 目的 研究氯化钴（CoCl2）诱导的低氧对甲状腺乳头状癌NPA细胞上皮间质转化的影响，初步探讨HIF-1a在其中的机制。方法 MTT检测CoCl2（50、100、150、200、250μmol/L）对细胞活力的影响，倒置显微镜观察低氧（150 μmol/L的CoCl2分别作用0、12、24、48 h）对细胞形态的影响，Western blot检测低氧（150 μmol/L的CoCl2分别作用0、3、6、12、24 h）对HIF-1a、E-cadherin和Vimentin表达的影响，Transwell法检测低氧（150 μmol/L的CoCl2分别作用0、6 h）对细胞侵袭、转移的影响，用免疫荧光对HIF-1a蛋白进行亚细胞定位。结果 低氧模拟剂CoCl2可抑制NPA细胞活力。随着CoCl2低氧处理时间的延长，NPA细胞逐渐获得间质细胞的形态特征，HIF-1a、Vimentin表达在0～6 h间逐渐增加，随后开始下降，E-cadherin表达持续降低，低氧0 h与6 h相比各蛋白表达均具有统计学差异(P＜0.01)。低氧组侵袭、转移细胞数目较对照组明显增加(P