《DB13T 1109-2009 食品中过敏原卵蛋白的测定 酶联免疫法》.pdf

I CS 67. 100 X 16 D B 1 3 、，竺，， J ﹄ ． r 咙七 冫pJ 丬 ︼ 省 地 方 标 ，比 DB 13/ T 1109-2009 食品中过敏原卵蛋白的测定 酶联免疫法 Determination of egg protein in foods Enzyme-linkedimmunosorbent assaymethod 2009-05-27发布 2009-06-11实施 河北省质量技术监督局发布 DB 13/ T 1109- 2 009 月 1 ] 吕 本标准由河北省质量技术监督局提出。 本标准起草单位：河北医科大学基础医学院、河北省食品安全重点实验室、河北省食品质量监督检 验研究院。 本标准主要起草人：吕品、张岩、李挥、周正、李丛芬、刘东、王丽霞、刘辰魁、范斌、康素芬。 DB 13/ T 1109-2009 食品中过敏原卵蛋白的测定酶联免疫法 范围 本标准规定了食品中过敏原卵蛋白的酶联免疫测定方法。 本标准适用于面制品和冷冻饮品中过敏原卵蛋白的测定。 本部分的方法检出限：0.6mg/kg 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的 修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法 原理 样品中的卵蛋白与试剂盒中微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗卵蛋白的抗体，加入酶标抗体后，用 TMB底物显色，样本吸光度值与其所含卵蛋白的含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样品中卵蛋白 的含量。 4试剂和材料 除非另有说明，在分析中均为分析纯试剂和GB/T6682中规定的一级水。 4. 1卵蛋白检测试剂盒。 4.1.148孔板：6条X8孔（涂布有抗蛋清蛋白的抗体）。 4.1.2全蛋粉标准溶液：Omg/L,0.5mg/L, 1.5mg/L,4.5mg几，13.5mg/Lo 4.1.3酶标抗体。 4.1.4染色液。 4.1.5终止液。 4.1.6 10倍浓缩洗涤液。 4.1.7 20倍浓缩萃取液。 4. 2萃取工作液：用水将20倍浓缩萃取液按1: 19体积比进行稀释，萃取工作液在4℃环境可保存一 个月。 4.3洗涤工作液：用水将10倍浓缩洗涤液按1: 9体积比进行稀释，用于酶标板的洗涤，洗涤工作液 在4℃环境可保存一个月 ‘ ︺ 仪器 只 ︺ 只 1 酶标仪：具450nm滤光片。 ︺ 八 民 乙 单道移液器：20¦ÌL^-200林L和200 卩L-1000 卩L. ︺ 0 刂 灬 漩涡混匀器。 月 0 1 份 冷冻离心机。 只 匕 ︺ 灬 八 刻度吸量管． 匀 0 均质器。 DB 13/ T 1109- 2009 5. 7水浴锅。 6分析步骤 6. 1提取 准确称取均质样品1.0g于50mL离心管中，加入20mL预热至60℃的稀释萃取液，60℃水浴10 min;2500r/min低温（4¡ãC）