生物制品学生物制品的质量管理、检定与标准化.pptVIP

生物学活性测定方法选择 体内测定和体外测定方法 a、体内测定：即整体动物测定，能为较大范围的重组产品的效价提供有用信息，但费时、昂贵、难操作及同时存在伦理问题，大多数情况下倾向于选择体外测定方法。 b、体外测定：可使用分离的器官或组织、原代细胞或传代细胞系，目前最常用方法是连续生长、因子依赖的、克隆化的细胞系的方法，其测定结果比较准确、重现性好、经济、容易使用和便于统计分析。 * * 生物学活性测定方法选择 2、定量、半定量、定性方法 a、通过研究首先选择能够定量评价的方法，最好的选择是背景较低的反应，并且对相关产品有陡峭的、可重复的剂量-反应曲线；其次考虑半定量方法（如NGF），最后考虑定性（如BMP）方法。 b、对生产工艺稳定，生物学活性测定方法复杂，可采用其他替代方法（如重组人生长激素用HPLC定量方法代替复杂生物活性测定方法）。 * * 第二节 生物制品的质量检定 一、生物制品的理化检定(附常规的检定方法) 生物制品的检定一般分理化检定、安全检定和效力检定三个方面 1、物理性状检定 1）外观检定：通过特定的人工光源检测生物制品的外观，其颜色、状态及加入蒸馏水后的澄清度应符合药物的规程要求。 （1）透明液制品：不得含有异物、白点、凝块、浑浊或摇不散的沉淀物。 * * 第二节 生物制品的质量检定 一、生物制品的理化检定(附常规的检定方法) 1、物理性状检定 1）外观检定： （2）悬浊液制品：应为乳白色浑悬液，不得有摇不散的菌块或其他异物。 （3）冻干制品：应为淡黄色或白色疏松体，呈海绵状或结晶状，应无融化现象。 * * 第二节 生物制品的质量检定 2）真空度 冻干制品进行真空封存，可进一步保证制品的生物活性和稳定性。可用高频火花真空测定器检查其真空程度，凡有真空度者瓶内应出现蓝紫色光辉。 3）溶解时间 按规程要求，加适量溶剂，检查溶解时间，其溶解速度应在规定时限内。 * * 第二节 生物制品的质量检定 2、化学检定：除水分检定外，按规定加入一定量无菌注射用水后进行检定 1）pH值测定：常用电极法 2）水分含量测定：常用卡尔.费休水分测定法，一般水分不能高于3％，卡尔.费休法的基本原理是： 依据卡尔非休法测定水份含量时，在存在甲醇和碱的情况下，水会按照下列化学反应式与碘和二氧化硫进行化学反应： H2O + I2 + SO2 + CH30H + 3RN → [RHN]SO4CH3 + 2[RHN]I 方法： 卡尔费休容量法测定样品中的水含量是根据滴定过程中消耗的卡氏试剂的量，计算出样品中的水含量。该方法具有操作简单、速率快、精度高等优点。 * * 第二节 生物制品的质量检定 3）蛋白质含量测定 （1）凯氏定氮法 （2）酚试剂法 （3）双缩脲法 （4）紫外分光光度法 （5）考马斯亮蓝法 4）防腐剂含量测定 （1）气相色谱法 （2）液相色谱法 （3）薄层层析法 2、化学检定 * * 第二节 生物制品的质量检定 2、化学检定 5）等电点的测定 用等电聚焦电泳法 6）分子量的测定 a、渗透压法 b、超速离心法 c、凝胶过滤法 d、SDS－PAGE法 * * 第二节 生物制品的质量检定 2、化学检定 5）等电点的测定 用等电聚焦电泳法 6）分子量的测定 a、渗透压法 b、超速离心法 c、凝胶过滤法 d、SDS－PAGE法 7)外源性残留DNA含量的检定 8）宿主菌残留蛋白含量的测定 9）残留抗生素含量的测定 * * 第二节 生物制品的质量检定 2、化学检定 10）纯度测定 (1)区带电泳 a、乙酸纤维膜电泳 b、聚丙烯酰胺凝胶电泳 c、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 （2）免疫电泳 a、对流免疫电泳 b、单向定量免疫电泳（火箭电泳） c、双向定量免疫电泳 （3）凝胶层析 * * 第二节 生物制品的质量检定 二、生物制品的安全检定 1、一般安全性检查 1）异常毒性试验 2）无菌试验 3）热原试验 2、杀菌、灭活和脱毒情况的检查 3、外源性污染检查 1）野毒（菌）检查 2）支原体检查 3）乙肝表面抗原、丙肝抗体和艾滋抗体的检查 4）残余细胞DNA检查 4、过敏性物质检查 * * 第二节 生物制品的质量检定 三、生物制品的效力检定 理想的效力试验应具备的条件 1、试验方法具最佳代表性，与人体使用应大体相似 2、试验方法不应烦琐 3、结果应明确 4、试验结果要能与流行病学高枝基本一致 5、所用试验动物应标准化 * * 第三节 基因工程生物制品的质量检测与控制 一、基因工程生物制品的特点 二、基因工程生物制品的质量要求 三、基因工程生物制品的质控要点 四、基因工程制品的质量检测 * * * * 第三章 生物制品的质量管理、检定与标准化 * * 第一节 生物制品的GMP管理 一、GMP概况 即（Good Manufactur