植株全氮全磷全钾含量的测定.doc

PAGE PAGE 7 植株全氮、全磷、全钾的测定 一、待测液的制备（H2SO4—H2O2消煮法） 二、植株全氮的测定（H2SO4—H2O2消煮，蒸馏法） 三、植株全磷的测定（H2SO4—H2O2消煮，钒钼黄比色法） 四、植株全钾的测定（H2SO4—H2O2消煮，火焰光度法 一、待测液的制备（H2SO4—H2O2消煮法） 1 H2SO4—H2O2消煮原理 植物样品在浓H2SO4溶液中，经过脱水、碳化、氧化等一系列的作用后，易分解的有机物则分解，然后再加入H2O2 ，H2O2在热的浓H2SO4溶液中会分解出新生态氧，具有强烈的氧化作用，可继续分解没被H2SO4破坏的有机物，使有机态氮全部转化为无机铵盐。同时，样品中的有机磷也转化为无机磷酸盐，故可用同一消煮液分别测定N、P、K（植株中K以离子态存在）。 2 主要仪器： 开氏瓶（50ml）或消煮管、150mL三角瓶；万分之一电子天平、电热板或普通电炉等；定氮仪等。 3 操作步骤 称取烘干、磨细的植物样品(过0.25 mm筛)0.3000g~0.5000g，置于50mL开氏瓶（或消煮管）中（勿将样品粘附在瓶颈上），先滴入少量水湿润样品，加浓硫酸8mL，摇匀（最好放置过夜），瓶口盖一弯颈小漏斗，在电炉上先缓缓加热，待浓硫酸分解冒大量白烟时再升高温度。消煮至溶液呈均匀的棕黑色时，取下开氏瓶，稍冷后提起弯颈漏斗，滴加30 %H2O210滴，并不断摇动开氏瓶。再加热(微沸)约5 min，取下，稍冷后重复滴加30 %H2O2 5~10滴，再消煮。如此反复进行3~5次，每次添加的H2O2应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后，再加热5~10min（以赶尽剩余的H2O2 )，取下开氏瓶冷却，用少量水冲洗漏斗，洗液流入开氏瓶中。将消煮液无损地洗入100 ml容量瓶中，用水定容，摇匀。 4 注意事项： （1）消煮开始时火要小； （2）加H2O2 时要等器皿少冷后，提起小漏斗，直接将H2O2 滴入溶液中； （3）消煮要彻底。消煮好的标志是：溶液呈无色或清亮色； （4）消煮液最后要赶尽H2O2 。否则会影响氮、磷的比色测定。方法是消煮液呈清亮色后再煮5-10分。也可观察液面的波动，赶尽H2O2后液面比较平静。 二、植株全氮的测定（H2SO4—H2O2消煮，蒸馏法） 1、方法原理 ????? 蒸馏过程的反应： （NH4)2SO4 + NaOH → Na2SO + 2NH3 + 2H2O ???? ?NH3? + H2O? → NH4OH ???? ?NH4OH + H3BO3? → NH4·H2BO3? + H2O ??? 滴定过程的反应： ????? NH4·H2BO3? + H2SO4 → （NH4)2SO4 + 2H3BO3 2、主要仪器、试剂 （1）主要仪器：定氮仪等。 （2）需用的试剂： 300 g·L-1H2 10 mol·L-1 NaOH溶液 硫酸（GB 625—77）：分析纯，0.005mol/L硫酸或0.01mol/L盐酸标准溶液 20 g·L-1硼酸 硼酸-指示剂混合液 A 硼酸（GB 628—78）：分析纯，2％溶液（W/V）； B 混合指示剂：0.5g溴甲酚绿（HG3—1220—79）和0.1g甲基红（HG3—958 —76）于玛瑙研钵中，加入少量95％乙醇，研磨至指示剂全部溶解后，加95％乙醇至 100ml。使用前，每升硼酸溶液中加20ml混合指示剂，并用稀碱调节至红紫色（pH值约4.5）。此液放置时间不宜过长，如在使用过程中pH值有变化，需随时用稀酸或稀碱调节之。 3、测定步骤 吸取待测液5.00～10.00 mL（含NH4+-N约1mg）置于蒸馏管中，蒸馏管置于定氮仪相应位置上。 在150ml三角瓶中，加入2％硼酸-指示剂混合液5ml，放在定氮仪冷凝管末端，管口置于硼酸液面以上3～4cm处。然后向蒸馏室内缓缓加入20ml 10mol/L氢氧化钠溶液，通入蒸汽蒸馏，待馏出液体积约50ml时，即蒸馏完毕。用少量已调节至pH4.5的水洗涤冷凝管的末端，取下三角瓶。 用0.005 mol/L硫酸（或0.01mol/L盐酸）标准溶液滴定馏出液由蓝绿色至刚变为红紫色。记录所用酸标准溶液的体积（ml）。空白测定所用酸标准溶液的体积，一般不得超过0.4ml。 4、结果计算 植株中N（%）=（V1-V0）×c×14×ts×10-3 ×100/m 式中： V1 ——样品测定所消耗标准酸mL数； ?????? V0 ——空白试验所消耗标准酸mL数； ?????? c——标准酸（H+1）的浓度mol·L-1；· ?????? 14 ——氮原子的摩尔质量（g·mol）； ?????? 10-3 ——mL换算为L； ?????? ts ——分取倍数；