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酶的生物合成的控制机制可分为以下两类: (1)诱导——促进酶的合成;(2)阻遏——抑制酶的合成。阻遏分为终产物阻遏和分解代谢阻遏。 酶活性控制机制分为:(1)终产物抑制或激活;(2)底物水平的抑制或激活;(3)辅助因子的调节;(4)酶原的激活与潜在酶的活化。 生物体内的能荷高低也是酶活性调控的常见模式:能荷高时,抑制分解代谢,降低ATP的合成;能荷低时,促进分解代谢,提高ATP的合成。 通过改变现成的酶分子活性来调节代谢的速率的方式。是酶分子水平上的调节,包括两个方面: 1、酶活性的激活:在代谢途径中后面的反应可被前面的反应产物所促进的现象;常见于分解代谢途径。 2、酶活性的抑制:包括:竞争性抑制和反馈抑制。 反馈:指反应链中某些中间代谢产物或终产物对该途径关键酶活性的影响。 凡使反应速度加快的称正反馈; 凡使反应速度减慢的称负反馈(反馈抑制); 反馈抑制——主要表现在某代谢途径的末端产物过量时可反过来直接抑制该途径中第一个酶的活性。主要表现在氨基酸、核苷酸合成途径中。 根据生化反应前后的物质对酶活性的增强与抑制,又分为前馈和反馈,前馈指前体物质导致;反馈由产物(常为终产物)所致。前馈与反馈均有正作用与负作用之分。 正作用:凡反应物能使代谢过程速度加快者称为正作用。 负作用:凡反应物能使代谢过程速度变慢者称为负作用。 2.1.2 酶活力的调控 按酶在代谢调节中的作用可分为: (1)调节酶(变构酶、同工酶)——与代谢调节关系密切; (2)静态酶——与代谢关系不密切; (3)潜在酶——指酶原、非活性型或与抑制剂接合的酶; (4)关键酶——是参与调控的酶的总称,做为一个反应链的限速因子,对整个反应起限速作用。 变构酶 脱敏作用 变构酶经特殊处理后,不丧失酶活性而失去对变构效应物的敏感性,称为脱敏作用。 使变构酶脱敏的方法有利用汞盐、对氯汞苯甲酸、0-5℃低温以及尿素和蛋白酶处理等。 (1)变构酶解聚 利用加热、加尿素或汞盐等理化因素处理后,可以使变构酶的多聚物解聚,导致脱敏,失去调节功能。 (2)基因突变 变构酶编码的结构基因的突变可引起脱敏作用,如诱变育得得抗结构类似物突变株中多发生这种变化。 因此,酶活力的调控,实质上是通过调节酶的空间结构来实现。 (1)前馈作用 在代谢途径中前面的底物对其后某一催化反应的调节酶有作用。改作用可以使对酶活性的抑制或激活。 (2)终产物抑制 在直链反应 A B… P中,当产物P积累过量时,产物P仅对顺序反应中的第一个酶E1的活性产生抑制作用,该作用类型称为终产物抑制。 (5)增效反馈抑制 当任何一个终产物单独过剩时,只部分地抑制第一个酶的活性,只有当所有终产物同时过剩时,才能引起强烈抑制,其抑制程度大于各自单独的抑制能力之和。 (1)、当细胞中全部是ATP时,能荷最大,为100%;若全部是AMP时,能荷最小,为0;当全部为ADP时,能荷为50%。 (2)、能荷不仅调节形成ATP的分解代谢酶类的活性,也调节利用ATP的生物合成酶类的活性。如异柠檬酸脱氢酶和磷酸果糖激酶受高能荷抑制,而丙酮酸羧化酶和天冬氨酸激酶在同一高能荷下却被活化。能荷高时,ATP的酶合成系统受抑制,ATP消耗酶系统被活化。 (3)体外呈抑制和活化作用的中间状态的能荷大约为0.85,此时两种酶系统达到平衡。 6、微生物代谢控制发酵的措施 根据代谢调节理论,通过改变发酵工艺条件(温度、PH、风量、培养基组成)和菌种遗传特性,达到改变菌体内的代谢平衡,过量产生所需产物的目的。 1.发酵条件的控制 2.改变细胞透性 3.菌种遗传特性的改变 1.发酵条件的控制 ①各种发酵条件对微生物的影响 同菌种,同培养基,培养条件不同,可获不同代谢产物(途径不同)。啤酒酵母,用葡萄糖,中性产乙醇,酸性产CO2,碱性产甘油。 ②使用诱导物 可用底物或底物类似物有效增加诱导酶的产量。 ③添加生物合成的前体 加前体,避开受抑制酶,大量合成终产物。 ④培养基成分和浓度的控制 速效碳、氮源可能引起分解代谢阻遏。应与迟效碳、氮源适量搭配。 2.改变细胞透性 培养基中加改变细胞透性物质,利于产物分泌,避免反馈抑制。 如: 1-5ml/L生物素控制膜中脂质合成; 青霉素抑制肽聚糖中肽链交联; 土温80或阳离子表面活性剂使壁中脂类流出; 控制Mn2+、Zn2+浓度干扰膜、壁形成; 筛选透性突变株。 3.菌种遗传特性的改变 营养缺陷型突变株; 如:利用谷氨酸棒状杆
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