蚕沙中生物碱成分的分离及蚕沙中1脱氧野尻霉素定量分析的现代色谱方法学分析药学;药物化学专业论文.docxVIP

中文摘要中文摘要 中文摘要 中文摘要 蚕沙(Faeces bombycis)即蚕食桑叶后的排泄物，是一种传统中药。因其 在治疗糖尿病，抗病毒，抗癌方面有显著的效果，引起了国内外大量学者 的关注。本论文对蚕沙中的生物碱成分进行了分离纯化，并对蚕沙生物碱中 的降血糖有效成分之一的卜脱氧野尻霉素(DNJ)，进行了含量测定方法的 研究。 首先，建立了实验室水平的蚕沙总生物碱提取工艺，利用酸水提取、 离子交换、硅胶吸附等方法制备了总生物碱提取物；进一步采用HPLC分 离，借助LC．MS，NMR等手段，确认了三种生物碱成分，分别为：甜菜碱， DNJ，(3R，5R)一二羟基一2(R)羟甲基哌啶(1，3-dideoxygalatonojirimycin)。 其中1，3-dideoxygalatonojirirnyein为一具有糖苷酶抑制活性的新化合物。 其次，对蚕沙中DNJ的含量测定进行了方法学考察，由于DNJ分子结 构中缺少发色团，使对其测定方法的建立带来一定的困难。本论文采用了 三种检测方法： (1)高效液相色谱一荧光检测法：建立了FMOC．C1柱前荧光衍生测定蚕 沙中卜脱氧野尻霉素(DNJ)的方法。蚕沙干粉经O．05mol／L盐酸提取，在加 入FMOC．C1的乙腈溶液的条件下，DNJ反应生成荧光产物，然后用高效液 相一荧光检测器测定。色谱柱：YMC．PackODS．A色谱柱(4．6ramX250mm， 5 la m)；流动相：乙腈一0．1％冰醋酸(40：60)；荧光激发光波长为254nm， 检测波长：322nm：线性范围为O．008mg／ml--一O．08mg／ml：重复性，稳定性 及重现性RSD分别为1．66％，1．89％，1．13％；平均回收率为99．6％。实验 测得蚕沙中DNJ平均含量为1．13‰。 (2)高效液相色谱一蒸发光检测法：酸水提取蚕沙中的DNJ，经无水乙醇 处理，并浓缩，定容，使提取液浓度达到检测限范围，然后用高效液相蒸 发光检测器测定。色谱柱Waters SCX(250minx4．0mm，50m)；流动相：水： 氨水：冰乙酸=1000：0．2：0．2；蒸发光检测器参数：漂移管：50℃，气体 压力：25psi，自动增益；线性范围为0．751．tg151xg；重复性，稳定性及重 现性RSD分别为1．02％，0．86％，1．53％：平均回收率为98．O％。实验测得 蚕沙中DNJ平均含量为1．01％。 1 中文摘要(3)高效液相色谱一二极管阵列检测法：蚕沙干粉经0．05mol／L盐酸提 中文摘要 (3)高效液相色谱一二极管阵列检测法：蚕沙干粉经0．05mol／L盐酸提 取，采用FMOC．C1作为衍生试剂，用二极管阵列检测器检测，自动扫描最 大吸收波长。色谱柱Waters C18(250minx4．0mm，50ha)；流动相：乙腈-0．1％ 冰醋酸(40：60)；检测波长：206．4 11111或265．4rim；线性范围为0．24ug．0．8ug； 两个波长下重复性，稳定性及重现性平均RSD分别为2．16％，1．34％，1．70％； 平均回收率为97．58％，RSD为2．42％。实验测得蚕沙中DNJ平均含量为 1．08‰。 本论文的研究为今后深入开发蚕桑资源提供了基础，三种检测方法都 能够简便、快速、准确地测定蚕沙中的DNJ含量，为DNJ的质量标准提供 可靠的分析方法。 关键词：蚕沙生物碱DNJ高效液相色谱 II AbslractAbstract Abslract Abstract Faeces bombycis，the larvae of silkworm’S碱cd aeject钆is a traditional Chinese medicinal herbs．Due to its remarkable effect of the c咒lie of the diabetes， anti--virus and anti··canc％it arouses the attention of many researchers in the world．In this paper,chemical constituents were extracted and isolated from the total alkaloids of Faeces bombycis，and 1-deoxynojirimycin(DNJ)，a representation of these alkaloids，is the main active component which call cure the diabetes，was investigated in the aspect of detection method． Firstly,we es