低分子量肝素治疗重症急性胰腺炎及对肺肾肝和脑保护作用的实验和临床研究外科学普通外科专业论文.docxVIP

低分子量肝素治疗重症急性胰腺炎及对肺、肾、肝和脑保 低分子量肝素治疗重症急性胰腺炎及对肺、肾、肝和脑保 护作用的实验和临床研究 摘要 重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)病情危重，发 展快，常并发全身炎症反应综合征和多器官功能障碍综合征 (MODS)，严重威胁患者生命，SAP患者主要死于多器官功能衰竭 (MOF)。SAP并发多器官损伤涉及众多因素，微循环障碍是SAP的 启动因子和持续损害因子11,2】，细胞因子的级联放大反应是导致 MODS的关键因素【3，41。我们【5】已经证实，低分子量肝素(10wmolecular weight heparin，LMWH)能够改善实验性SAP胰腺的微循环和抑制 SAP动物的炎症反应。本研究主要对LMWH治疗SAP及对胰外器 官保护作用进行实验研究和前瞻性、随机性临床研究，以进一步明 确其疗效，为广泛临床应用LMWH治疗SAP及胰外器官损伤提供 科学依据。 第一部分 低分子量肝素治疗重症急性胰腺炎及对肺、肾、肝和脑 保护作用的实验研究 背景重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，sAP)病情危重， 发展快，常并发全身炎症反应综合征和多器官功能障碍综合征 (multiple organ dysfunction syndrome，MODS)，严重威胁患者生命， 目前病死率高达20％．40％。在SAP并发MODS中涉及众多因素， 其中微循环障碍是SAP的启动因子和持续损害因子，核因子kappa Bf Nuclear factor-kappa B，NF-r．B)的活性升高从而触发的炎症介质 瀑布效应是导致MODS的关键因素。LMWH具有多种药理作用， 我们的实验研究已证型51，LMWH能够溶解血栓、改善胰腺的微循 环障碍，同时通过抑制炎症反应，达到治疗SAP的效果。本研究旨 在通过动物实验，探讨LMWH对SAP的治疗效果及对肺、肾、肝 和脑的保护作用及其机制，为临床采用LMWH治疗SAP多器官损 伤提供实验依据。 方法将SD大鼠64只随机分为3组：(1)假手术组(s组)： 16只，只进行麻醉及开腹，不制作SAP模型，也不予LMWH治疗；(2) SAP组：24只，制作SAP模型，但不予LMWH治疗；0)LMWH治 疗组(LT组)：24只，制作急性胰腺炎模型后4h给予LMWH治疗。 s组在关腹后24h，SAP组在SAP模型成模后24h，LT组在LMWH 治疗后24h，经下腔静脉采集血标本，取胰腺、肝脏、肾脏、肺脏、 治疗后24h，经下腔静脉采集血标本，取胰腺、肝脏、肾脏、肺脏、 脑组织标本。检测血清淀粉酶(AMY)、血清肌酐(Cr)、血清谷丙 转氨酶(ALT)、血清白细胞介素．6 0L-6)、血清内皮素．1(ET-1)、 血清肿瘤坏死因子．a(耵噼a)、血清髓鞘碱性蛋白(MBP)、脑组织 干／湿比重、肺组织湿／干比重和肾脏、肺脏组织P65基因及P65蛋白 的表达，用光镜做形态学检查和脑组织电镜检查；观察3d动物存活 率。 结果 (1)血清AMY、Cr、ALT水平：SAP组AMY、Cr、 ALT水平均显著高于S组和LT组(均P0．001)，LT组血清AMY、 Cr水平显著高于s组(P分别0．05，O．001)，u1组和S组血清ALT 水平无显著差异(P0．05)。(2)血清IL-6水平：SAP组显著高于s 组和LT组(P均O．001)，LT组血清IL．6水平显著高于S组(P 0．001)。(3)血清E*1水平：SAP组显著高于S组和LT组(均P O．001)，LT组和S组血清ET-1水平无显著差异俨0．05)。(4)血 清TNF．a水平：SAP组显著高于S组和LT组(均PO．001)，LT 组和S组血清曰师．a水平无显著差异(P0．05)。(5)血清MBP水 平：SAP组血清MBP水平显著高于s组和LT组(分别P0．01，P o．05)，LT组和s组血清MBP水平无显著差异(Po．05)。(6)肺 脏组织P65 mRNA及P65蛋白表达：两者在S组无阳性表达；LT 组两者均有7例阴性表达和1例弱阳性表达；SAP组中，P65蛋白 为1例阴性表达、3例弱阳性表达和4例强阳性表达，P65 mRNA为 1例阴性表达、4例弱阳性表达和3例强阳性表达。与SAP组比较， LT组P65 mRNA及P65蛋白表达显著减少(P均0．05)。(7)1肾脏 组织P65 mRNA及P65蛋白表达：两者在S组无阳性表达；SAP组 两者均有5例弱阳性表达和3例强阳性表达；U’组中，P65蛋自为 7例阴性表达和1例弱阳性表达，P65mRNA为5例阴性表达和3例 弱阳性表达。与SAP组比较，LT组P65 mRNA及P65蛋白表达显 著减少(均PO