厄洛替尼联合放射诱导人胃肿瘤mkn45细胞株凋亡效应的实验研究肿瘤学专业论文.docxVIP

I I qYlltY111l 19I901101111115157717I It7II 目 录 中文摘要 0 0 1 英文摘要 O O O O O O 4 英文缩写 8 研究论文 厄洛替尼联合放射诱导人胃肿瘤MKN45细胞株凋亡效应的 实验研究 前言刖吾 ··一··”一“””一””一“” 一””·“””””····“”““”一”””””一一””“”““”““”’9··· ······ ······ ··· 9 材料与方法 10 结果 ””””一””一””．．”””一”一”“一””······ -············ ······20 附图 D O 24 附表 ·························· ····················· ···················35 讨论··············································································39 结果·····················o o··· o o ········· ············ 47 参考文献 48 综述分子靶向药物治疗胃癌的进展 51 致谢·················· ············ ······················· ······················60 个人简历 61 中文摘要厄洛替尼联合放射诱导人胃肿瘤MKN45细胞株 中文摘要 厄洛替尼联合放射诱导人胃肿瘤MKN45细胞株 凋亡效应实验研究 摘 要 目的：观察厄洛替尼联合放疗对MKN45细胞的增殖抑制作用以及对 细胞周期和凋亡的影响，了解厄洛替尼对放疗的增敏作用。 方法： 1 MKN45细胞在370、5％的C02孵箱于含10％胎牛血清和1％双抗(青 霉素和链霉素)的DMEM培养基中，24小时后取对数生长期细胞用于实 验。 2甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测．(1)不同浓度的厄洛替尼作用于MKN45细 胞后24、48、72、96小时后的细胞生长情况。(2)不同剂量照射MKN45 细胞后72小时的细胞生长抑制率。(3)不同浓度厄洛替尼联合放射线对 MKN45细胞的生长抑制率。本研究所有实验重复3次。 3倒置显微镜下观察各组细胞的形态学变化。 4单细胞集落形成实验观察对照组、单纯照射组、厄洛替尼单药组、厄洛 替尼+照射组的克隆数。 5多靶单击模型S=I--(1一e。D脚)N，拟合存活曲线并计算Do、Dq值，计 算放射增敏比。 6流式细胞仪检测MKN45细胞经厄洛替尼及厄洛替尼联合照射处理后细 胞周期分布情况。 7流式细胞仪(FCM)检测Annexin V-EGFP和PI染色的MKN45细胞的 凋亡率。 8 Western Blots法检测MKN45细胞经厄洛替尼及厄洛替尼联合照射处理 后Bax与Bcl．2的表达。 9统计分析所有计量资料的数据均以X q-S表示，实验数据采用SPSSl 1．5 统计软件处理。均数比较采用单因素方差分析、LSD—t检验，相关分析采 用析因设计方差分析，与对照组比较，P0．05为有统计学意义。 结果： l厄洛替尼对MKN45细胞的作用(MTT法) 中文摘要厄洛替尼能明显抑制删45细胞的生长，随用药时间的延长，抑制 中文摘要 厄洛替尼能明显抑制删45细胞的生长，随用药时间的延长，抑制 率明显上升(PO．05)；随用药浓度的提高，抑制率逐渐升高(PO．05)。 MKN45细胞的存活分数SF值随厄洛替尼药物浓度的增加或作用时间的延 长而减少(PO．001)。 2放射线及厄洛替尼对MKN45细胞的作用(MTT法) 给予2、4、6、8Gy的剂量照射后72小时，MKN45细胞的生长明显 受到抑制，并且随着照射剂量的增大，抑制率也有增大的趋势。当厄洛替 尼浓度为2．5、5、10、1 5pmol／L时，与放射线联合的抑制作用大于单药