电化学研究铝和纳米铝形态化合物对依赖于辅酶ⅰ脱氢酶活性的影响-化学;分析化学专业论文.docxVIP

因此纳米粒子的安全性问题受到了广泛的关注。本论文利用电化学方法研究了纳 因此纳米粒子的安全性问题受到了广泛的关注。本论文利用电化学方法研究了纳 米形态及其他各种铝形态化合物对三种依赖于辅酶I(NAD+／NADH)的脱氢酶 活性的影响，并利用荧光光谱和圆二色谱法研究了影响机制。主要结果如下： 1．利用碳纳米管修饰电极，通过测定反应中NADH的氧化电流的变化测定 了铝形态化合物对谷氨酸脱氢酶(GDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、乙醇脱氢酶 (ADH)活性的影响。实验结果发现，铝对GDH和ADH的活性具有一定的抑 制作用，而对MDH的活性具有一定的激活作用。 2．不同形态的铝对酶活性的影响不同，且受到pS值的影响。AI(III)在pH 为6．5时，对GDH和ADH的抑制作用和对MDH的激活作用最强，而随着pH 的增大，作用减弱，这是由于pS值会引起Al(m)存在形态的变化，而在较低 的pH下，能够酶体系作用的AI(III)成为主要形态；AI r3在pH为7．5时，对GDH 和ADH的抑制作用和对MDH的激活作用最强，在pH6．5和8．5时作用相似， 这可能是由于灿13在pH7．5下最稳定，而在偏酸性或碱性条件下聚合度变小所致。 3．运用荧光光谱法和圆二色谱法研究了A10IO和砧13对依赖于 NAD+／NADH脱氢酶活性影响的可能的作用机制，结果表明AI(III)和All3能够引 起NAD+和脱氢酶本身的构象的变化。当AI(III)和AIr3加入到NAD+-脱氢酶体系 中时，AI(III)能够占据NAD+的活性位点而引起NAD+的构象的改变，使得其不 容易与脱氢酶发生作用的折叠式结构增加， 从而引起酶活性的改变；而AIOID 和All3所引起的脱氢酶的构象变化会导致蛋白质的a-螺旋、p-折叠和无规卷曲 结构之间的相互转化，从而影响底物与酶之间的诱导契合，也会引起酶活性的改 变。 关键词：电化学，AI(III)，All3，NAD+／NADH-脱氢酶，谷氨酸脱氢酶(GDH)、 苹果酸脱氢酶(MDH)、乙醇脱氢酶(ADH)，构象 different different effects on the activity of biological enzyme．In recent years，the potential effects of nanoparticles，which lead to unforeseen health or environmental hazards to human beings or other animal species，have raised considerable concen塔．In this paper,we studied the effects of nanometer-sized tridecameric aluminum polycation (nano-All3)and other Al species compound on the activity of several nicodnamide adenine dinucleotide㈣ⅦADH)一dependent dehydrogenase using electrochemical measurements in aqueous solutions．Moreover,fluorescence spectroscopy and circular diehroism(CD)spectrum was applied to study the proposed effect mechanism．11坨main results were listed as following： 1．To study the effects of aluminum species on the activity of glutamate dehydrogenase(GDH)，alcohol dehydrogenase(ADr0 and malate dehydrogenase (MDH)，a funetionalized multi-wall nanotubes(MWNT)modified glass carbon electrode(GCE)Was applied to monitor amperometric“curve for the oxidation of NADH．The experiment results showed that aluminum could inhibit the activity of GDH and ADH，but activate the MDH activity． 2．The effect of alu