超声微泡造影剂介导pedf基因转染大鼠视网膜脉络膜的实验研究眼科学专业论文.docxVIP

重庆医科大学硕士研究生学位论文符号说明 重庆医科大学硕士研究生学位论文 符号说明 英文缩写 英文全称 中文全称 AGE Agarose gel electrophoresis 琼脂糖凝胶电泳 AMD Age—related macular degeneration 年龄相关性黄斑变性 CDNA Completment deoxyribo nucleic acid 互补脱氧核糖核酸 CNV Choroidal neovascularization 脉络膜新生血管 DNA Deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸 dNTP Deoxynucleosides triphosphate 脱氧核糖核苷三磷酸盐 EB Ethidium bromide 溴化乙锭 FFA fluorescein fundus angiography 眼底荧光血管造影 h Hour(s) 小时 HE Hemotoxylin and eosin 苏木素／伊红染色 IF immunofluorescence 免疫荧光 LB Luria—Bertani culture LB培养基 Min Minute(s) 分钟 OD Optical density 光密度 PBS Phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 PEDF Pigment epithelium—derived factor 色素上皮源性因子 rpm Voltion per minute 转|食 I冲E Retinal pigment epithelium 视网膜色素上皮 Reverse transcription and polymerase RT-PCR 逆转录聚合酶链反应 chain reaction S Second(s) 秒 Taq Vaq DNA polymerase 嗜热DNA聚合酶 TB Tuberculosis culture media TB培养基 U Units 单位 V Volt 伏特 VEGF vascular endothelial growth factor 血管内皮生长因子 重庆医科大学 重庆医科大学 研究生学位论文独创性声明 本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他 人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构 的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已 在论文中作了明确的说明并表示谢意。 申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。 学位论文版权使用授权书 本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学 位期间论文工作的知识产权单位属重庆医科大学。本人保证毕业离校后，发表论 文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学。学校有权保留并向国家有关 部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学 位论文的全部或部分内容C保密内容除外)，可以采用影印、缩印或其他手段保 存论文． 论文作者签名： 指导教师签名： 日 期： 重庆医科大学硕士研究生学位论文超声微泡造影剂介导PEDF基因转大鼠视网膜、脉络膜 重庆医科大学硕士研究生学位论文 超声微泡造影剂介导PEDF基因转大鼠视网膜、脉络膜 的实验研究 摘要 目的：脉络膜新生血管(CNV)与许多眼底疾病有关，常引起严重 的视力障碍【1．2】。其形成的关键因素之一是促血管生长因子和抑制血管 生长因子之间平衡被破坏【3】。色素上皮源性因子(PEDF)是近年来新 发现的一种强有力的新生血管抑制因子14制。超声微泡造影剂作为一种 新型的基因转移载体，可达到高效、定向的基因转染目的。本研究通 过超声微泡介导PEDF基因转染CNV大鼠的视网膜、脉络膜，观察 PEDF的表达和对CNV的抑制情况，为临床防治CNV提供新的思路。 方法：本实验用氩绿激光(波长514．5nm)围绕视乳头(距视乳头 1-2PD)进行视网膜光凝，激光功率为O．8W，光斑直径501．tm，曝光时 间0．05s，建造实验性大鼠脉络膜新生血管模型。在造模后第14天进 行组织病理学和FFA观察，确定CNV的形成。 造模成功后再进行以下两部分的研究：第一部分是以分别超声微 泡与脂质体作为基因载体进行转染，比较两种载体的基因转染效率和 对CNV的抑制作用。第二部分是通过不同途径将携带PEDF质粒的超声 微泡造影剂引入体内，比较三种注射方式的基因转染效率和对CNV的 抑制作用。以上两部分实验均采用RT-PCR检测PEDF的mRNA表达情 况，免疫荧光检i9lJJPEDF蛋白表达情况，FFA观察CNV的抑制情况。 结果： 1、