真武汤对帕金森小鼠模型的治疗作用设计实验.docVIP

真武汤对帕金森小鼠模型 的治疗作用设计实验 班级：中西医1001 姓名：徐冲 学号：102304128 真武汤对帕金森小鼠模型的治疗作用设计实验 中西医1001徐冲学号：102304128 （一） 设计思路： 帕金森病（Parkinsons disease,PD）是老年人常见的一种神经退行 性疾病。该病主要病理特征是中脑黑质多巴胺神经元变性坏死，其内 含的酪氨酸径化酶显著减少，使的多巴胺生成困难，从而使纹状体分 泌的多巴胺含量下降。临床以肌强直，震颤和运动功能障碍为主要症 状。现在，MPTP（1-甲基4苯基-1, 2, 3, 6-四氢卩比喘）是最重要和使用 最广泛的PD动物模型产生物⑴。它有着其他模型所不具有的一些独特 优势，比如它能特异性地损毁多巴胺神经元的结构，其诱导产生的症 状与人类PD非常相似。 建立帕金森小鼠模型，分成三组：一组为对照组，两组为帕金森 模型组。模型组一组不干涉，另一组注入真武汤。通过行为学实验， 结果经过统计学处理，得出真武汤对帕金森小鼠模型是否有治疗作用0 （二） 目的和原理 目的:研究中药汤剂对帕金森小鼠模型治疗作用 真武汤治疗帕金森理论基础：“太阳病，发汗，汗出不解，其人仍发热, 心下悸，头眩，身^[run]动，振振欲摭地者，真武汤主之” [2]0其中, “身隅动，振振欲锵地者”，也就是肌肉跳动与整个身体在振动屮的倾 斜度。与帕金森的临床表现:静止性震颤、运动迟缓、肌强直和姿势步 态障碍极为相似。 （三）实验对象: C57BL小鼠，雄性，8周龄，体质量20?22g,由扬大医学院提供。 （四） 器材与药品： 药品：1-甲基-4-苯基-1, 2, 3, 6-四氢毗唳（MPTP）,二丙苯磺胺 （Probenecid）,真武汤（茯苓 三钱9g芍药 三钱9g白术 二钱6g生 姜三钱9g附了炮去皮，一枚，破八片9g。上五味，以水八升，煮取 三升，去滓，温服七合） 器材：疲劳转棒仪（Rotarod）注射器（20ml, 5ml, 1ml） （五） 步骤与观察： 1?模型建立：小鼠54只（18只一组），随机分为对照组与模型 组1与模型组2o共进行10次MPTP注射，每次持续5周，对照组每 次在腹腔注射Probenecid（250mg/kg）,30niin后均在皮下注射生理盐水。 模型组1和模型组2每次则先腹腔注射Probenecid （剂量同对照组）， 30min后皮下注射MPTP,剂量为15mg/kg[3]o且模型组1皮下注射生 理盐水15mg/kg,模型组2皮下注射真武汤15mg/kgo最后一次给药4 周后开始行为学测定 对照组 模型组1 模型组2 注射 Probenecid 是 是 是 30min后注射 生理盐水 MPTP、生理盐 水各 15mg/kg MPTP、真武汤 各 15mg/kg 2?行为学实验（Rotarod实验）：参照lau等⑷的实验方法，略加 修改：最后一次MPTP注射后过一周开始行为学实验，以不同的转棒 旋转速度下小鼠在转棒上停留的时间来表征小鼠的行为学活性。共有9 个递增的旋转速度(8,10,12,14,16,18,20,23,25rpm),每个速度的测量时 间为150so以动物在转棒上停留的时间对相应的转速作图。对于每一 只动物，其累计的运动活性得分都被计算和表达成曲线下的面积。每 一周或者两周进行一次行为学观察，持续6周?。 停留时间 8 10 12 14 16 18 23 25 对照组 模型组1 模型组2 3.采用SAS统计软件包进行统计学处理，数据用均数土标准差表 示，采用团体t检验分析 结果猜想： 在各组屮，动物在转棒上的行为学表现都是不均一的，但是， 对于单个动物来说，其行为学得分却长达数周持续稳定。实验中每个 组都使用了比较多的样本，以减少组内差异。在最后一次注射MPTP2 周后进行的首次行为学测验中，对照组与模型组1和2即有显著差异。, 并且这种差异在往后的6周5次测验中一直保持稳定。随着转速的增 加，模型组小鼠在转棒上停留的累积时间与对照组相比更短。但服川 真武汤的模型组2比未服用真武汤的模型组1在转棒上停留的累积时 间要长。 （七）讨论： 对于帕金森病的治疗，有些学者从肝、从风论治；有些从肝肾不 足、气血亏虚的角度来滋补肝肾、补益气血；也有学者从痰、热、血 瘀的角度。以上治法均取得一定的疗效。而真武汤则从水治。此为阳 虚水泛，阳虚失于温养，水气浸渍四肢经脉，故见肌肉颤抖。 真武汤方由炮附子、芍药、茯苓、口术、生姜组成。方中炮附子 温振少阴阳气，肾阳复则下焦气化启动，自能蒸腾水邪，使水有所主; 白术苦温燥湿，健脾制水，使水有所制；茯苓淡渗利水，佐白术健脾, 脾机运转，则水湿下渗；生姜宣散水气，助附了布阳；芍约活血脉、 利小便。五味合用，共奏温阳利水之功⑹。 （八）结论：