《中国药典》2015版-抑菌效力检查法.pdfVIP

1121 抑菌效力检查法 抑菌剂是指抑制微生物生长的化学物质，有时也称防腐剂。抑菌效力检查法 系用于测定灭菌及非灭菌制剂的抑菌活性，以评价最终产品的抑菌效力，同时也 可用于指导生产企业在研发阶段制剂中抑菌剂浓度的确定。 如果药物本身不具有充分的抗菌效力，那么应根据制剂特性 （如水溶性制剂） 添加适宜的抑菌剂，以防止制剂在正常贮藏或使用过程中可能发生的微生物污染 和繁殖使药物变质而对使用者造成危害，尤其是多剂量包装的制剂。 在药品生产过程中，抑菌剂不能用于替代药品生产的 GMP 管理，不能作为 非无菌制剂降低微生物污染的唯一途径，也不能作为控制多剂量包装制剂灭菌前 的生物负载的手段。所有抑菌剂都具有一定的毒性，制剂中抑菌剂的量应为最低 有效量。同时，为保证用药安全，成品制剂中的抑菌剂有效浓度应低于对人体有 害的浓度。 抑菌剂的抗菌效力在贮存过程中有可能因药物的成分或包装容器等因素影 响而变化，因此，应验证成品制剂中的抑菌剂效力在效期内不因贮藏条件而降低。 本试验方法和抑菌剂抑菌效力判断标准用于包装未启开的成品制剂。 培养基 培养基的制备 胰酪大豆胨液体培养基、胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖液体培养基、 沙氏葡萄糖琼脂培养基 照无菌检查法（通则 1101）制备。 培养基的适用性检查 抑菌效力测定用培养基应进行培养基的适用性检查，包括成品培养基、由脱 水培养基或按处方配制的培养基均应检查。 菌种 试验所用的菌株传代次数不得超过 5 代（从菌种保藏中心获得的冷 冻干燥菌种为第 0 代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保证试验菌株 的生物学特性。培养基适用性检查的菌种及新鲜菌体培养见表 1。 表 1 培养基适用性检查、方法适用性试验、抑菌效力测定用的试验菌培 养条件 试验菌株 试验培养基 培养温度 培养时间 金黄色葡萄球菌 胰酪大豆胨琼脂 (Staphylococcus aureus) 培养基或胰酪大 30～35℃ 18～24小时 〔CMCC(B)26 003 〕 豆胨液体培养基 铜绿假单胞菌 胰酪大豆胨琼脂 (Pseudomonas 培养基或胰酪大 30～35℃ 18～24小时 aeruginosa ） 豆胨液体培养基 〔CMCC(B)10 104 〕 大肠埃希菌 胰酪大豆胨琼脂 (Escherichia coli) 培养基或胰酪大 30～35℃ 18～24小时 〔CMCC(B)44 102〕 豆胨液体培养基 白色念珠菌 沙氏葡萄糖琼脂 (Candida albicans) 培养基或沙氏葡 20～25 ℃ 24-48小时 〔CMCC(F) 98 001 〕 萄糖液体培养基 黑曲霉 沙氏葡萄糖琼脂 5～7天或直到 (Aspergillus niger) 培养基或沙氏葡 20～25 ℃ 获得丰富的孢 〔CMCC(F) 98 003 〕 萄糖液体培养基 子 菌液制备 取表 1 大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的新鲜培 养物用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或 0.9%无菌氯化钠溶液制成 适宜浓度 的菌悬液。取表2 黑曲霉的新鲜培养物加入 3～5ml 含 0.05 ％（ml/ml ）聚山梨酯 80 的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然 后，采用适宜方法吸出孢子