陈楠超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的生产 (1).pptVIP

项目四：超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的生产任务１：ＳＯＤ制备方案的制定生药１１２１２０１１４２３２０１陈楠 SOD 中文名称： 超氧化物歧化酶 英文名称： superoxide dismutase;SOD 定义： 编号：EC 1.15.1.1。催化超氧化物自由基O－2和氢离子反应形成过氧化氢和分子氧的酶。 应用学科： 生物化学与分子生物学（一级学科）；酶（二级学科） 历史 1938年Marn等人首次从牛红血球中分离得到超氧化物歧化酶,开始算起，人们对SOD的研究己有七十多年的历史。 1969年McCord等重新发现这种蛋白，并且发现了它们的生物活性，弄清了它催化过氧阴离子发生歧化反应的性质，所以正式将其命名为超氧化物歧化酶。 自由基 自由基（Free Radical）是一类非常活跃的化学物质，是个有不成对（奇数）电子的原子、原子团、分子和离子。其中最重要的是氧自由基，它可聚集在体表、心脏、血管、肝脏和脑细胞中。如果它沉积在血管壁上，会使血管发生纤维性病变，导致动脉管硬化，高血压，心肌梗塞；沉积在脑细胞时，会引起老年人神经官能不全，导致记忆、智力障碍以及抑郁症，甚至老年性痴呆等，是造成人类衰老和疾病的元凶。 氧自由基 ⑴无机氧自由基：超氧自由基、羟基自由基 ⑵有机氧自由基：过氧自由基、烷氧自由基、多元不饱和脂肪酸自由基RUFA、半醌自由基。另外，单线态氧1O2、H2O2、NO2、NO等分子虽然没有奇数电子，但氧化能力强，因此有人把它们和上述氧自由基放在一起，统称为活性氧。 世界各国对“超氧化物歧化酶”的作用认定 美国注册专利号为（CN1152337A）：用于预防和治疗大脑局部出血、溃疡、消除炎症、心率失常、浮肿、中毒、风湿、类风湿、风湿性关节炎、放射性损伤、药物中毒等症。 　　法国注册专利号为（CN1167441A）：用于预防和治疗特异性脑损伤、非特异性脑损伤而引起的脑功能识别障碍。 　　欧洲注册专利号为（499621）：用于预防和治疗癌症及术后放、化疗带来的脑损伤，抑制癌细胞再形成或扩散。 　　日本注册专利号为（4327541，4312533）：用于治疗器官移植后的抗免疫反应具有奇效。用于治疗大脑局部出血导致神经坏死，防止半身不遂的治疗药物。 对人体的作用 抑制心脑血管疾病 抗衰老 防治自身免疫性疾病 肺气肿 辐射病及辐射防护 老年性白内障 抗氧化 预防慢性病抗疲劳 消除副作用 避免二次伤害 化解女性的危机 有效降低血脂、胆固醇、血压 抗辐射 增强肝肾功能 对糖尿病有明显的恢复作用。 应用领域 1.药物类 主要集中在炎症病患者，尤其治疗类风湿关节炎、慢性多发性关节炎、心肌梗塞、心血管病、肿瘤患者以及放射性治疗炎症病患者 2.生化制药 作为一种生化酶制剂，广泛应用于临床和科研上，可抗衰老，抗肿瘤、调节人体内分泌系统 3.化妆品 可添加在化妆品中，具有抗氧化抗腐蚀的优良性能。以SOD为主要成份的化妆品风靡世界，引发了化妆品历史上的一场革命，使人类永葆青春美丽梦想成真 4.保健食品、饮料 SOD糖、SOD口服液、SOD干啤等都非常畅销。在饮料、糖果、糕点等食品中加入SOD既可利用其抗腐蚀性延长保质期，又可调节人体内分泌系统。 材料 啤酒废酵母 试剂：甲苯、氯仿、凭水乙醇、异丙醇、丙酮、磷酸二氢钾、ＥＤＴＡ、邻苯三酚等均为分析纯。 酵母培养基（％）：麓蓬糖8，蛋白质1，酵母膏1。 灭菌条件：１２１℃．３０ｍiｎ 提取SOD工艺流程 酵母泥 洗涤 酵母培养基 灭菌 酵母菌复壮 SOD纯化 SOD提取 实验过程 一、废酵母的预处理 二、酵母的复壮培养 三、酵母中SOD的提取——异丙醇法 四、SOD纯化 一、废酵母的预处理 二、酵母的复壮培养 三、酵母中SOD的提取——异丙醇法 四、SOD纯化 注意事项 丙酮分级沉淀操作时，宜在4～10℃条件下进行，有利于提高蛋白沉淀效果，保护酶活性。 提取SOD后的酵母残渣及杂蛋白可考虑加工为饲料或饲料蛋白添加剂，真正达到清洁生产的目的。 为降低成本，异丙醇均可考虑回收浓缩循环使用。 SOD 活性测定采用改进的微量邻苯酚自氧化法。 提取条件的研究