利用大孔吸附树脂与高速逆流色谱联用技术大量制备-江苏农业科学.PDFVIP

江苏农业科学　２０１８年第４６卷第２３期 — ２０７— 王　刚，胡俊强，史建荣，等．利用大孔吸附树脂与高速逆流色谱联用技术大量制备脱氧雪腐镰刀菌烯醇的方法［Ｊ］．江苏农业科学，２０１８，４６ （２３）：２０７－２１１． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１８．２３．０５３ 利用大孔吸附树脂与高速逆流色谱联用技术 大量制备脱氧雪腐镰刀菌烯醇的方法 王　刚，胡俊强，史建荣，徐剑宏 ［江苏省食品质量安全重点实验室－省部共建国家重点实验室培育基地／农业农村部农产品质量安全风险评估实验室（南京）／ 江苏省现代粮食流通与安全协同创新中心／江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所，江苏南京２１００１４］ 　　摘要：脱氧雪腐镰刀菌烯醇是一类危害严重的真菌毒素，针对其毒理学的研究与脱毒研究需要大量毒素纯品。采 用大孔吸附树脂与高速逆流色谱联用技术，从禾谷镰刀菌ＰＨ－１的大米培养物中提取并纯化脱氧雪腐镰刀菌烯醇。 首先采用８５％甲醇溶液提取毒素，之后以ＸＡＤ－４大孔吸附树脂柱初步纯化，用３０％甲醇溶液洗脱；初步纯化产物以 高速逆流色谱进行精制，采用乙酸乙酯－水（１∶１）溶剂系统进行分离，脱氧雪腐镰刀菌烯醇在 １５０ｍｉｎ被洗脱，最终 产物纯度为９６．７８％，回收率为７６．２０％。采用该方法可以从１０００ｇ大米发酵物中一次提取出５００ｍｇ以上毒素纯品。 　　关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇；分离纯化；大孔吸附树脂；高速逆流色谱 ＋ 　　中图分类号：Ｓ４３２．４４　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１８）２３－０２０７－０５ ［１］ 　　脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ｄｅｏｘｙｎｉｖａｌｅｎｏｌ，简称ＤＯＮ）又称呕 症 。相关研究表明，ＤＯＮ还具有血液毒性、骨髓毒性以及 吐毒素，是一种危害巨大的真菌毒素，主要由镰刀菌产生，常 致癌性［２－３］，因此ＤＯＮ毒素对于食品安全存在重大威胁。根 见于受赤霉病侵害的谷物籽粒中。针对 ＤＯＮ的毒理学研究 据最新的ＧＢ２７６１—２０１７《食品安全国家标准　食品中真菌 表明，ＤＯＮ可以阻滞细胞周期并引发细胞凋亡，进而对哺乳 毒素限量》，我国对谷物及其制品中 ＤＯＮ的限量标准 动物的肠道上皮细胞产生毒害，阻碍肠道上皮细胞增殖与分 为 １０００ ｇ／ｋｇ。 μ 化，同时ＤＯＮ也会引发肠道炎症反应，造成呕吐、腹泻等病 江苏省近年来谷物中ＤＯＮ毒素污染情况严重，根据笔者 调研结果，２０１５、２０１６年江苏省小麦中ＤＯＮ毒素平均含量分 收稿日期：２０１８－０６－２９ 别为（２０８７±１１２） ｇ／ｋｇ、（２６０１±１２６） ｇ／ｋｇ，其平均含量 μ μ 基金项目：江苏省农业科技自主创新资金［编号：ＣＸ（１７）１００３］；国家 ［４］ 已超过限量标准２倍，超标率均在７０％以上 。由于 ＤＯＮ 自然科学基金（编号Ｕ１６０４２３４）；江苏省自然科学基金 毒素污染，农户近年来蒙受了重大经济损失。因此，ＤＯＮ的 青年基金（编号：Ｂ。 脱毒处理手段对于保