2019年基因工程的基本操作程序2.pptVIP

第二节 基因工程的基本 操作程序;生长快、肉质好的转基因鱼(中国); 基因工程（DNA重组技术）是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。;一、目的基因的获取;从基因文库中获得目的基因;基因组文库:;基因组文库的构建;② cDNA文库的构建-----反转录法： 以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需的基因。;;;思考？;利用PCR技术扩增目的基因;3、基本前提：; 是一小段单链DNA，作为DNA复制的起始点，在核酸合成反应时，作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链.;利用PCR技术扩增目的基因;PCR扩增仪;;二、基因表达载体的构建;;①载体与表达载体的区别：二者都有标记基因 和复制原点两部分DNA片段。表达载体在载 体基础上增加了目的基因、启动子、终止子 三部分结构. ②用到的工具酶：既用到限制酶切割载体，又 用到DNA连接酶将目的基因和载体拼接，两 种酶作用的化学键都是磷酸二酯键. ③启动子、终止子对于目的基因表达必不可少. ④目的基因不能单独进入受体细胞，必需以表 达载体的方式携带进去。;三、将目的基因导入受体;1、农杆菌