脑缺血再灌注后海马谷氨酸和神经生长因子的表达.pdfVIP

大连医科大学学报 第 27 卷第 3 期 Vol.27 No.3 2005 年 6 月 Jωmal of Dalian Medical University June 2∞5 脑缺血再灌注后海马谷氨酸和神经生长因子的表达 胡志云王洪津姜长斌雷 F肘，韩杰2 (1.大连医科大学第二临床学院神经内科，辽宁大连 116027; 2. 大连医科大学第一临床学院神经内科，辽宁大连 11ω11) 摘要:[目的]揭示谷氨酸和神经生长因子的表达变化在这皮性神经元死亡(delayed neurona1 death DND)过程中的意义。[方法]用免疫组织化学方法检测脑缺血再灌注后 1 、 2 和 7 d 后海马 CAl 、 CA3 神经元及齿状回颗粒细胞(DGCs) 的谷氨酸和神经生长因子表达。并用电镜观察神经元起微 结构变化。[结果]脑缺血再灌注后第 1 和第 2 夭，海马 CAl 神经元谷氨酸表达的辉皮值分别为 60.67 土 3.18 和 81.22 土 7.12 ，明显高于对照组的 42.25 :1: 2.79 (PO.Ol)， 且第 2 天的表达明显 高于第 1 天(PO.Ol); 神经生长因子表达的辉度值分别为 34.95 士 2.80 和 28.83 土 1.82 ，明显低 于对照姐的 49 土 2.38( P 0.01) ，且第 2 天表达明显低于第 1 天(P 0.05) 。脑缺血再灌注后第 7 夭神经元脱失仅见于海马 CA1 区。[结论]短暂缺血性损伤时出现的持续性的谷氨酸上调和神经 生长因子表达下调可能参与 DND 的形成。 关键词:脑缺血再灌注;谷氨酸;神经生长因子; DND 中图分类号:R735.2 文献标识码:A 文章编号: 1671 -7295(2005)03 - 0170 - 04 短暂的全脑缺血过程能引起海马 CAl 区锥体 3.3 -二氨基联苯胶(Diaminobenzidine , DAB)。 细胞在缺血后数天发生死亡，而顶叶皮层，海马 美国 Sigma 公司。其余试剂均为国产分析纯。 CA3 区和齿状回颗粒细胞(DGCs)等对这种缺血有 l.2 动物分组 一定耐受性，延长缺血时间能使神经元死亡的范围 健康雄性蒙古沙土鼠44 只，3-4 月龄，体重 50 扩大到纹状体和丘脑，这种现象称之为迟发性神经 -60 g ，由大连医科大学寄生虫教研室提供，随机分 元死亡(delayed neuronal death DND ) [1]。海马 CAl 为 2 组。第 1 组再灌注 1 、 2、 7 d 各 12 只，共 36 只， 区是 DND 最易损的区域，其对 DND 发生机制的揭 第 2 组 8 只。缺血再灌注组(CIR) :缺血 5 min ，再 示无疑具有代表性意义。本研究从缺血再灌注后海 灌注 1 、 2、 7d 后处死。对照组:为假手术。 马谷氨酸和神经生长因子(nerve growth factor , 1. 3 脑缺血再灌注模型制备 参照 Kirino[l] 的方法，乙酷麻醉，颈部正中切 NGF) 的表达方面对 DND 形成机制作了进一步探 讨。 口，动脉夹迅速夹闭双侧颈总动脉。观察动物缺血 1 材料和方法 后反应，以缺血早期(1 min 内)翻正反射消失、呼吸 及心跳加快、竖毛，之后动物除睫毛反射外其余反射 1. 1 药品和试剂