致病疫霉拮抗菌株YR.pdfVIP

微生物学通报 Jul. 20, 2016, 43(7): 1513−1523 Microbiology China /wswxtbcn tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150617 研究报告 致病疫霉拮抗菌株 YR-7 的分离鉴定及其活性物质 任兴波 武志华 崔海辰 高向红 冯福应 刘惠荣* ( 内蒙古农业大学生命科学学院 内蒙古 呼和浩特 010018) 摘 要：【目的】从黄河边的农田土壤中分离筛选拮抗致病疫霉的粘细菌，鉴定目标菌株，分析 其发酵上清液的稳定性及对马铃薯晚疫病菌的抑制效果，为活性物质分离鉴定及抗马铃薯晚疫病 菌生物农药的研发奠定基础。【方法】采用兔粪诱导法分离菌株，通过平板对峙法筛选对马铃薯 晚疫病菌有拮抗作用的粘细菌，通过形态特征、生理生化特征以及 16S rRNA 基因序列分析对菌 株进行鉴定。采用称重法测定菌株生长曲线，通过平皿法测定菌株不同生长时期发酵上清液对致 病疫霉的菌丝生长抑制率和浓缩发酵上清液的稳定性。通过马铃薯离体叶片涂布浓缩发酵上清液 和接种病原菌孢子悬浮液法，测定该菌株对马铃薯晚疫病的防病作用。【结果】从土壤样品中共 分离获得 7 株粘细菌，其中 4 株拮抗致病疫霉，拮抗效果最强的为 YR-7 菌株，菌丝的生长抑制 率为 96% ，该菌株被鉴定为Myxococcus xanthus 。培养 7 d 后，菌株发酵上清液对致病疫霉的抑 制活性趋于稳定。浓缩发酵上清液经 30−50 °C 处理后，对致病疫霉菌丝的生长抑制率可达 50.90% ，高于 50 °C 时抑菌活性逐渐下降，90 °C 处理后菌丝的生长抑制率仍可达 25.45% 。浓缩 发酵上清液在 pH 4.0−9.0 条件下比较稳定，保持 40.21% 以上菌丝的生长抑制率，当 pH4.0 或 pH9.0 时，抗菌活性显著降低。活性物质不能被蛋白酶降解，其抗菌活性不受紫外线、自然光 照射的影响。对马铃薯离体叶片的生防效果检测表明，YR-7 的浓缩发酵上清液处理组叶片相对 病斑面积仅为 0.35% ，对照组的相对病斑面积高达 68.19%。【结论】粘细菌菌株YR-7 可以产生 抗马铃薯晚疫病菌的次生代谢产物，抗菌活性物质具有较好的稳定性，可以有效抑制致病疫霉侵 染马铃薯叶片，具有开发成抗马铃薯晚疫病生物农药的潜在价值。 关键词：致病疫霉，拮抗菌株，分离鉴定，黄色粘球菌，活性物质 Foundation item: National Natural Science Foundation of China (No. *Corresponding author: E-mail: huirong_liu@ Received: August 14, 2015; Accepted: November 25, 2015; Published online (): December 11, 2015 基金项目：国家自然科学基金项目(No. *通讯作者：E-mail ：huirong_liu@ 收稿日期：2015-08-14 ；接受日期：2015-11-25 ；优先数字出版日期() ：2015-12-11 1514 微生物学通报 Microbiol. China 2016, Vol.43, No.7 Isolation and identification of the strain YR-7 against Phytophthora infestans and study on its antibiotic substances REN Xing-Bo WU Zhi-Hua CUI