药物诱导细胞凋亡时DNA检测技术的探讨.PDFVIP

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2019-03-30 发布于天津
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药物诱导细胞凋亡时DNA检测技术的探讨.PDF

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828 马靖 ,等药物诱导细胞凋亡时 DN A 检测技术的探讨 ·技术方法研究 · 药物诱导细胞凋亡时 DN A 检测技术的探讨 1 2 2 1 1 * 马靖 , 庞大本 , 池旭生 , 彭文烈 , 徐安龙 1 中山大学生命科学学院生化系与新药开发中心 ,广东广州 5 10275 2 中国中医研究院基础理论研究所 ,北京 100700 【摘要】目的:比较检测细胞凋亡时DN A 变化的三种方法。方法 :联合采用 Hoech st 33342 和 P I 荧光双染显微镜观察 ,DN A 凝胶电泳和流式细胞仪测定三种方法检测甘草提取物诱导 M GC803 细胞凋亡时DN A 的变化。结果:低浓度药物作用时 , 荧光显微镜下观察到DN A 凝聚和 P I 排斥 , 但 DN A 电泳不出现L adder 断裂片段 , 4 ℃重悬后 FCM 才能检测到凋亡峰; 高浓度药物作用时 , DN A 呈L adder 断裂 , FCM 检测到凋亡峰 , 但荧光显微镜下观察到 P I 着色和 ( ) ( ) DN A 凝聚共存。结论 : 1 应慎重使用依据 P I 着色区分凋亡和坏死细胞的方法; 2 有些情况下 ,凋亡细胞经乙醇固定后DN A 断裂片段的逸出是一个缓慢的过程 ,通过 4 ℃重悬可提高流式细胞仪检测凋亡细胞的准确性。关键词 :细胞凋亡 ; DN A 断裂 ; 染色质凝聚中图分类号 :Q 26 文献标识码 :A 文章编号 : 1000 - 467X (2000) 08 - 0828 - 03 Meditat ion of met hodol ogy f or i mprove ment on detect ing D NA c hange during a poptosis of M GC803 cell l ine 1 2 1 * MA J ing , PAN G Daben , XU A nlo ng , et al 1 D e a r t m en t o B ioche m is t r a n d B io h a r m ace u t ical Cen t re , Col le e o L i e S cience , p f y p g f f Z hongs h a n U n i v e rs i ty , Gu a ngz hou 5102 75 , P R Ch i n a 2 I ns t i t u te