红树林植物内生放线菌I07A.pdf

中国医药生物技术 2012 年 2 月第 7 卷第 1 期 Chin Med Biotechnol, February 2012, Vol. 7, No. 1 5 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.003 ·论著 · 红树林植物内生放线菌 I07A-01824 发酵液中杀线虫活性成分的分离、 纯化与鉴定 陶玲，旭格拉 ·哈布丁，韩宁宁，余生艳，闫蕾蕾，栾迎春， 刘少伟，郭琳，蒋忠科，余利岩，孙承航 【摘要】 由于秀丽隐杆线虫在生命科学研究中的广泛 目的 建立稳定有效的体外杀线虫模型，并从红树林植物木 应用以及病害线虫日趋严重的抗药性问题[9-14] ，本 榄内生放线菌 I07A-01824 的发酵液中分离纯化具有杀线 研究希望通过建立秀丽隐杆线虫模型，发现新型的 虫活性的物质，并鉴定其化学结构。 微生物来源的杀线虫物质，对生命科学的发展和抗 方法 在体外杀线虫模型指导下，利用硅胶层析、高效液相 线虫剂的发现起到一定的推动作用。最终，本实验 色谱等方法对放线菌 I07A-01824 的发酵液进行分离纯化， 以秀丽隐杆线虫致死率为活性检测方法，从红树林 得到高纯度的杀线虫活性物质；通过现代波谱分析技术对其 内生放线菌 I07A-01824 的发酵产物中分离纯化得 进行结构解析，确定其化学结构。 到了具有良好杀线虫作用的物质 5,8-二烯十四酸， 结果 红树林内生放线菌 I07A-01824 的次级代谢产物中 该微生物产物体外杀线虫活性未见报道。 具有较强杀线虫活性的物质，为一不饱和脂肪酸，化学结构 为 5,8-二烯十四酸；27.3 mg/L 剂量下开始显示对秀丽隐杆 1 材料与方法 线虫有活性，其 24 h 后的 LC50 值为 162.8 mg/L 。 1.1 材料 1.1.1 菌种 红树林内生放线菌 I07A-01824 ，分 结论 此不饱和脂肪酸对线虫有较强的致死作用，并且在内 离自我国广西山口红树植物木榄[Bruguiera 生放线菌 I07A-01824 菌株的次级代谢产物中稳定存在。 gymnorrhiza (Linn.) Savigny]叶片，经鉴定后确定其 【关键词】 脂肪酸类，不饱和； 抗线虫药； 放线菌 [15] 为黄白链霉菌（S.albidoflavus ） ，在供试培养基 属； 红树科 上形成浅灰白色菌落，无可溶性色素生成[16] 。目前 中国医药生物技术, 2012, 7(1):5-8 保存于中国医学科学院医药生物技术研究所国家 药用微生物菌种保藏中心。 线虫是线形动物门（Aschelminthes ）线虫纲 1.1.2 供试线虫 秀丽隐杆线虫及其培养方法由 （Nematoda ）的一类蠕虫动物。目前世界上对线虫 福建师范大学田宝玉老师提供。 的关注主要包括三方面：首先是作为模式生物的秀 1.1.3 层析材料及试剂 100 ~ 200 目柱层析正 丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）。秀丽隐杆线 虫是生命科学领域研究十分深入的模式生物，因其 具有细胞数目少、全身通透、含有大多数动物神经