藻胆蛋白ApcE缺失突变体的自催化重组研究.pdfVIP

第 28 卷第10 期 武汉理工大学学报 Vol. 28 No.10 JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY OF TECl剧OLOGY Oct. 2006 2006 年 10 月 藻胆蛋白 ApcE 缺失突变体的自催化重组研究 习红丽1 ， 2 ，甘春昨3 ，周 明3 ，赵开也1，3 (1.华中科技大学生命科学与技术学院武汉 430074:2. 武汉理工大学资源与环境工程学院，武汉 430070; 3. 华中科技大学环境科学与工程学院，武汉 430074) 摘 要: 采用聚合酶链式反应(PCR)扩增出 Anabaena.sρPCC7120 别藻蓝蛋白 ApcE(1 -240 )的一系列缺失突变体基 因 :αþcE(14-240) 、 αpcE(25-240) 、 αpcE( 63-240) 、 aþcE(85-240) 、 apcE(121-240) 、 apcE(133-240) 、 apcE(187-240) ， 在大 肠杆菌中高效表达分别获得相对应的缺失突变体蛋白。对上述脱辅基蛋白与藻蓝胆素(PCB) 的体外自催化重组进行了 研究。结采表明:在含有 4 mollL尿素的磷酸苦甲缓冲体系中，ApcE(25-240)脱辅基蛋白可与藻蓝胆素体外重组实现共价 连接，获得的色素蛋白质具有最大吸收峰(À l11RX二 656 nm)和荧光发射峰(À = 670 nm) ，其余 6 个缺失突变体蛋白仅能 max 与藻蓝胆素非共价连接，不能发生自催化重组。该结采为进一步研究连接多肤 ApcE 的结构和功能提供了信息，具有重 要意义。 关键词: 藻月旦体; 藻蓝月旦素; ApcE; 缺失突变体; 体外重组; 自催化连接 中图分类号: Q 754 文献标志码: A 文章编号:1671-4431(2006)10-0049-03 Autocatalytic Reconstitution of Deletion Mutants of Phycobiliprotein ApcE DIAO Hong-li 1,2 , GAN Chun-hui 3 , ZHOU Miη矿， ZHAO Kai-hong 1,3 (1. Sch∞1 of Life Science and Technology , Huazhong University of Science and Technology , Wuhan 430074 , China: 2. Sch∞1 of Resource and Environmental Engineeri吨， Wuhan University of Technology , Wuhan 430070 , China: 3. Sch∞1 of Environmental Scienc巳 and Engineeri吨， Huazhong University of Science and Technology , Wuhan 430074 , China) Abstract : Genes of deletio口 mutants of phycobilisome ∞re-membrane linker protein ApcE in Anabaerω5ρ. P CC7 120 were constructedbyPCR: apcE (14-240)