红细胞孵育渗透脆性检测试剂盒比色法.pdf

上海源叶生物科技有限公司 红细胞孵育渗透脆性检测试剂盒(比色法) 产品简介： 红细胞(Red blood cell，RBC)也称红血球，是血液中数量最多的一种血细胞，脊椎动 物体内通过 RBC 运送氧气，RBC 同时还具有免疫功能。在贫血检查中，可通过红细胞渗透 脆性试验来检测红细胞膜的缺陷。 源叶生物红细胞孵育渗透脆性检测试剂盒(比色法)(Erythrocyte Incubated Osmotic Fragility Assay Kit )检测原理是将患者血液置于 37 孵育24h，使红细胞代谢继续进行， 由于葡萄糖的消耗，储备的ATP 减少，导致需要能量的红细胞膜对阳离子的主动传递受阻， 造成钠离子在红细胞内聚集，细胞膨胀，孵育渗透脆性增加，某些有细胞膜缺陷以及某些酶 缺陷的红细胞的葡萄糖和ATP 很快被耗尽时，孵育渗透脆性明 增加，该实验被称为红细 胞孵育渗透脆性试验。该试剂盒主要用于检测人、动物血液的红细胞孵育渗透脆性，并计算 红细胞中性脆性(MCF)。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 产品组成： 试剂(A): NaCl phosphate buffer 100ml 4 试剂(B): ddH2O 100ml RT 自备材料： 1、小试管 2、比色杯 3、分光光度计 操作步骤(仅供参考) ： 1、取肝素抗凝血2ml，分成2 份，1 份立即实验，另1 份密闭37 孵育24h 后再作实验。 2、取小试管或恰当容器，依次,按照下表稀释成不同浓度。每次检查应设正常对照。 试管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 试剂(A) (ml) 3.4 3.0 2.8 2.6 2.4 2.2 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 0.8 0.4 试剂(B) (ml) 0.6 1 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 2.4 2.6 2.8 3.2 3.6 NaCl 浓度(g/L) 8.5 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.0 1.0 400-666-5481 3、分别吸取40μl 肝素抗凝血加入上述 NaCl 稀释液中，轻轻混匀，室温(20℃)静置30min。 4、将各管再次混匀1 次，离心沉淀5min，取上清液。 5、用分光光度计检测 540nm 波长，以NaCl phosphate buffer 作为空白管调零，测定 各溶血管的吸光度。 6、计算溶血百分率：以 1g/L NaCl 完全溶血管的吸光度为 100%，计算相应氯化钠浓度 的溶血百分率。溶血百分率(%)=各管吸光值/100%溶血管吸光值×100 7、计算红细胞中性脆性(MCF) ：以溶血百分率为纵坐标，以氯化钠浓度为横坐标，作溶血 曲线图，即为红细胞盐水渗透脆性曲线。在曲线上，50%溶血的氯化钠浓度为红细胞中 性脆性(MCF)。 参考区间 ： 未孵育，50%溶血氯化钠浓度 4.00～4.45g/L 37℃孵育24h，50%溶血氯化钠浓度 4.46～5,9g/L 注意事项 ： 1、每次检查应设正常对照。 2、NaCl phosphate buffer pH 值及温度必须恒定，pH 改变0.1 或温度改变 5%，均可使 果偏差0.01%。 3、NaCl phosphate buffer 采用高纯度氯化钠配制，普通氯化钠不宜采用。 4、NaCl phosphate buffer 不要被酸碱污染，同时注意密闭保存。 5、血液样品应直接滴入液体，不宜沿管壁流入。 6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期：12 个月有效。