瘤背石磺肌肉生长抑制素基因的克隆及组织表达分析.pdf

第41 卷 第 5 期 水 产 学 报 Vol. 41, No. 5 2017 年 5 月 JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA May, 2017 文章编号: 1000-0615(2017)05-0658-11 DOI: 10.11964/jfc.20160810503 瘤背石磺肌肉生长抑制素基因的克隆及 组织表达分析 * 刘 欣， 史艳梅， 王冬凤， 沈和定 ， 杨铁柱， 李 杰， 李柏航 (上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室，上海 201306) 摘要：为探究石磺由海洋向陆地进化过程中肌肉生长和发育的分子机制，实验以石磺科 贝类转录组数据为基础，采用RACE方法从瘤背石磺肌肉中首次克隆到MSTN cDNA 的全 长并做了相应的组织表达分析。结果显示，瘤背石磺MSTN 基因cDNA全长2667 bp ，包括 1650 bp的开放阅读框，374 bp 的5′ 端非翻译区，643 bp 的3端非翻译区，共编码549个氨 基酸。预测该基因编码的蛋白质原子总量为8776 ，分子式为C2774H4331N783O862S26 ，分子 质量约为63.27 ku ，理论等电点为6.02 ，信号肽预测结果显示，N 端具有21个氨基酸长度 的信号肽。瘤背石磺MSTN 具有MSTN 的共同特征，包括蛋白酶水解位点RSRR和C端多肽 生物活性区以及9个保守的半胱氨酸残基。通过进化树分析，瘤背石磺MSTN 与加州海兔 MSTN 的亲缘关系最近。RT-PCR结果显示，MSTN 基因在各个组织中均有表达；含肌纤 维组织中的表达量低于内脏器官的表达量，在肝胰腺中的表达量最高，腹足表达量最 低。MSTN 基因一级结构具有很高的保守性，说明该基因在进化上的限制性和功能的重 要性；同时该基因在石磺非肌肉组织中表达，表明该基因不仅有抑制肌肉生长的作用， 还参与其他生命活动的调节。 关键词: 瘤背石磺；肌肉生长抑制素；基因克隆；组织表达；RACE 中图分类号: Q 785 ；S 968.2 文献标志码: A [8] 石磺科(Onchidiidae)隶属于软体动物门(Mo- 和韧性，提高石磺对环境的适应性 ，但石磺生 llusca) 、腹足纲(Gastropoda) 、肺螺亚纲(Pulmo- 存环境的差异往往导致石磺不同组织肌肉的含 [9] nata) 、石磺总科(Onchidioidea) ，全身裸露无壳， 量、致密程度以及含水量 都存在较大差异，因 具有较高的营养价值和经济价值，主要生活在 此研究石磺肌肉生长相关基因能够为石磺从海 浅海、滩涂潮间带甚至潮上带，呈现一个从海 生到陆生的适应性研究提供一定的分子依据，