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生物分子表征工作流程 AGILENT BIO-MONOLITH PROTEIN A 和 PROTEIN G 亲和色谱柱 在本文中，安捷伦应用化学家们将为您提供液相色谱系统优化与生物分子表征所 需配置方面的相关建议。他们还将以通用方法为例指导您快速入门，并介绍如何 通过进一步方法优化达到您的具体分离目标。 如需获取更多应用信息，请访问/chem/advancebio Agilent 1260 Infinity 生物惰性液相色 流动相 谱系统 结合缓冲液：50 mM 磷酸钠缓冲液，pH 7.4。 洗脱缓冲液：见下表。 Agilent Bio-Monolith Protein 亲和色谱柱与 所有 HPLC/UHPLC 系统兼容 进样量 进样量 ，样品中 浓度 。 1 - 5 µL mAb 1 - 5 mg/mL 样品可溶于 或流动相 中。色谱柱进样量 H O A 2 最大为 50 µL 或 400 - 500 mg mAb/进样。 流速 1.0 - 3.0 mL/min （高速）。流速为 1.0 mL/min 时 峰形更尖锐更高，信噪也比更出色。 柱温 与其他洗脱液相比， 的折射率更低。 HCl 成功分离的温度通常为 25 °C。色谱柱使用温度 如果所用样品浓度低，并需要考虑基线噪 范围为 4 - 40 °C。 音和伪峰，那么可选择 作为洗脱液。 HCl 检测条件 UV 280 nm 流动方向 突出端 兼容的洗脱缓冲液 色谱柱 洗脱缓冲液 浓度 pH Bio-Monolith Protein A 柠檬酸 0.1 M 2.5 - 3.0 平整端 甘氨酸 0.1 M 2.5 - 3.0 乙酸 5% - 20% 流动方向 HCl 12 mM - 0.1 M Bio-Monolith Protein G 柠檬酸 0.1 M