琼脂糖电泳中核酸染料Goldview最佳使用方案的建立.pdf

第３５卷　第４期 遵 义 医 学 院 学 报 Ｖｏｌ．３５　Ｎｏ．４ ２０１２年８月 　　　　　 　　　　　 ＡＣＴＡＡＣＡＤＥＭＩＡＥＭＥＤＩＣＩＮＡＥＺＵＮＹＩ Ａｕｇ．２０１２  琼脂糖电泳中核酸染料 Ｇｏｌｄｖｉｅｗ最佳使用方案的建立 王　燕，彭莉萍，罗镇明 （遵义医学院珠海校区生物化学与细胞分子生物学教研室，广东 珠海　５１９０４１） ［摘　要］目的 确定琼脂糖凝胶电泳中使用核酸染料Ｇｏｌｄｖｉｅｗ的最佳浓度和方法，尽可能减少实验中Ｇｏｌｄｖｉｅｗ 用量，控制其对实验室环境的污染。方法 配置含不同浓度Ｇｏｌｄｖｉｅｗ的上样缓冲液，混合不同浓度 ＤＮＡ溶液的琼 脂糖凝胶电泳，然后对比预染样品法、前染法及后染法的染色效果。结果 实验结果显示上样缓冲液中含０．４％ Ｇｏｌｄｖｉｅｗ的预染样品法电泳检测核酸的效果最佳且能检测的核酸样品浓度在 １６．５ｎｇ或以上为最佳。结论 核酸 染料Ｇｏｌｄｖｉｅｗ在核酸的琼脂糖凝胶电泳中使用的最佳方案为预染样品法，实验中推荐浓度达到普通实验要求，并 且最易控制对周围环境的污染。 ［关键词］琼脂糖凝胶电泳；核酸染料；Ｇｏｌｄｖｉｅｗ ［中图法分类号］Ｑ３３　　［文献标识码］Ａ　　［文章编号］１０００２７１５（２０１２）０４０２７６０３ ＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｓｃｈｅｍｅｏｆｔｈｅｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｄｙｅｓＧｏｌｄｖｉｅｗｉｎ ｔｈｅａｇａｒｏｓｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ Ｗａｎｇｙａｎ，Ｐｅｎｇｌｉｐｉｎｇ，Ｌｕｏｚｈｅｎｍｉｎｇ （ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，ｔｈｅＺｈｕｈａｉＣａｍｐｕｓｏｆＺｕｎｙｉＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ， ＧｕａｎｇｄｏｎｇＺｈｕｈａｉ５１９０４１，Ｃｈｉｎａ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｃｏｎｆｉｒｍｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄｍｅｔｈｏｄｓｏｆｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｄｙｅｓＧｏｌｄｖｉｅｗ ｕｓｅｄｉｎｔｈｅａｇａｒｏｓｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓｔｏｒｅｄｕｃｅｔｈｅａｍｏｕｎｔｏｆＧｏｌｄｖｉｅｗａｎｄｆｕｒｔｈｅｒｃｏｎｔｒｏｌｉｔｓｐｏｌｌｕｔｉｏｎ ｔｏｔｈｅｌａｂｏｒａｔｏｒｙｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ．ＭｅｔｈｏｄｓＤｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆＧｏｌｄｖｉｅｗｉｎｔｈｅｌｏａｄｉｎｇｂｕｆｆｅｒｗｅｒｅ ｐｒｅｐａｒｅｄａｎｄｍｉｘｅｄｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆＤＮＡｓｏｌｕｔｉｏｎｉｎｔｈｅａｇａｒｏｓｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ．Ｔｈｅ ｐｒｅ－ｓｔａｉｎｉｎｇ，ｒｏｕｔｉｎｅｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｓｔａｉｎｉｎｇａｎｄｓｔａｉｎｉｎｇａｆｔｅｒｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓｗｅｒｅｃｏｍｐａｒｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅｌｏａｄｉｎｇｂｕｆｆｅｒｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ０．４％ Ｇｏｌｄｖｉｅｗｉｎｔｈｅｐｒｅ－ｓｔａｉｎｉｎｇｍｅｔｈｏｄｗａｓｂｅｓｔ，ｉｎｗｈｉｃｈｔｈｅｏｐｔｉ ｍａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｓａｍｐｌｅｓｗａｓ１６．５ｎｇｏｒａｂｏｖｅ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅｏｐｔｉｍａｌｓｃｈｅｍｅｏｆ ｔｈｅｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｄｙｅｓＧｏｌｄｖｉｅｗｉｎａｇａｒｏｓｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓｉｓｔｈｅｐｒｅ－ｓｔａｉｎｉｎｇｍｅｔｈｏｄｗｉｔｈｔｈｅｒｅｃ ｏｍｍｅｎｄｅｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｔｏｍｅｅｔｔｈｅｃｏｍｍｏｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔａｎｄｔｈｅｅａｓｉｅｓ