选择性磷酸酶抑制剂Salubrinal对急性百草枯中毒大鼠肺组织细胞自噬.PDF

中华危重病急救医学2014年9月第26卷第9期 ChinCritCareMed，September2014，Vol.26，No.9 ·671 · ·论著· 选择性磷酸酶抑制剂Salubrinal对急性百草枯中毒 大鼠肺组织细胞自噬和凋亡的影响 李海峰 邢宝鹏 权玉兰 孙明莉 【摘要】 目的 观察选择性磷酸酶抑制剂Salubrinal治疗对急性百草枯（PQ）中毒大鼠肺组织细胞自噬和 凋亡的影响，并探讨其治疗机制。方法 将200只Wistar大鼠按计算机生成的随机排列表分为4组，每组50 只。一次性灌胃40mg/kgPQ溶液1mL制备PQ染毒模型，之后每日1次腹腔注射1mL生理盐水（NS）；对照组 一次性给予1mLNS灌胃，之后每日2次腹腔注射1mLNS；Sal0.5和Sal1.0组分别于PQ染毒后1、3、5d腹 腔注射0.5mg/kg或1.0mg/kgSalubrinal1mL，每日1次。染毒后7d取肺组织，苏木素-伊红（HE）染色后观察 肺组织形态学改变；免疫组化染色观察肺组织自噬相关蛋白LC3-Ⅱ阳性表达；蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测肺组织LC3-Ⅱ和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）的蛋白表达。结果 HE染色结果显 示：PQ染毒组肺组织结构部分破坏，肺泡壁塌陷，肺泡腔扩大，局部炎性细胞浸润，肺泡隔显著增厚，局部明显 出血；Sal0.5组和Sal1.0组肺组织病理改变较PQ染毒组明显减轻。免疫组化染色显示：与对照组比较，PQ染 毒组、Sal0.5组和Sal1.0组肺组织LC3-Ⅱ阳性表达均明显降低（A值：78.34±10.71、76.52±8.21、77.48± 9.11比117.58±15.26，均P＜0.05）；而后3组间两两比较差异无统计学意义（均P＞0.05）。WesternBlot结果显 示，与对照组比较，PQ染毒组肺组织LC3-Ⅱ、caspase-3蛋白表达均明显升高〔LC3-Ⅱ（A值）：0.22±0.05比 0.14±0.03，caspase-3（A值）：0.115±0.013比0.023±0.006，均P＜0.05〕。与PQ染毒组比较，Sal0.5组和Sal1.0组 肺组织LC3-Ⅱ、caspase-3蛋白表达均明显降低〔LC3-Ⅱ（A值）：0.19±0.05、0.18±0.04比0.22±0.05， caspase-3（A值）：0.078±0.012、0.076±0.010比0.115±0.013，均P＜0.05〕。结论 急性PQ中毒大鼠肺组织发生 了内质网应激-自噬；Salubrinal可降低急性PQ中毒大鼠肺组织发生细胞自噬，抗细胞凋亡，从而起到治疗作用。 【关键词】 中毒，百草枯；Salubrinal；自噬； 凋亡；磷酸酶抑制剂 The effect of selective phosphatase inhibitors Salubrinal on autophagy and apoptosis in the lung tissue of rats with acute paraquat poisoning Li Haifeng* ，Xing Baopeng ，Quan Yulan ，Sun Mingli. *Department of Emergency ，First Hospital of Jilin University ，Changchun 130031 ，Jilin ，China Corresponding author ：Sun Mingli ，Email ：sunmingli_1972@163.com 【Abstract 】 Objective ToinvestigatetheeffectofselectivephosphataseinhibitorsSalubrinalonautophagyand apoptosisinthelungtissueofratswithacuteparaquat（PQ）poisoning，andtoexploreitsmechanism.Methods 200 Wistarratswererandomlydividedintofourgroupsbyrandomizedarrangementtableformedbycomputer，with