液态活检技术与其临床应用 (2).pptx

讲者介绍;液态活检技术及其临床应用;传统的肿瘤诊断技术;传统的肿瘤诊断存在的问题;2015年十大突破技术--液态活检技术;传统而又崭新的检测技术--“液态活检”;“液态活检”的标记物; ctDNA（circulating tumor DNA），即循环肿瘤DNA，从字面意思来讲，指的是由肿瘤细胞释放到血液循环系统中的DNA。但是在了解ctDNA之前，我们要知道另一个与之相关的概念——cfDNA。 cfDNA（cell-free DNA），或者叫血浆游离DNA，是血浆中游离存在的DNA，它们有的来自于正常细胞，有的来自于异常细胞（如肿瘤细胞），还有部分来自于我们外部（如病毒DNA）。 ;人们逐渐明白，cfDNA中 携带肿瘤特有突变的那一小部分DNA，确确实实是由肿瘤细胞释放出来的，ctDNA的研究终于与肿瘤关联起来。;在几乎所有种类的癌症中，都检测到了ctDNA所带有的标志性突变，并且肿瘤越晚期，病情越严重，肿瘤的恶性程度越高， ctDNA特有突变的频率就越高。一项针对15种癌症进行的ctDNA测序研究显示，分别有47%，55%，69%，82%的I-IV期癌症病人中能检测到高于一定频率的ctDNA突变；而另一项使用更高灵敏度测序技术的研究则表示，对于II期以上的病人，均能100%检测到突变。;CtDNA临床应用领域;检测9名接受特罗凯一线治疗的NSCLC患者血浆中ctDNA的EGFR突变情况，一直到患者进展至PD。;著名的JohnsHopkins大学最近的一项研究揭示了ctDNA的真面目，它其实是一种具备广泛应用前景、高敏感性、高特异性的肿瘤标志物，;研究者还在不同级别的肺癌患者中对CAPP-Seq进行了验证，发现II-IV期的NSCLC中检测敏感性100%，I期的NSCLC中敏感性为50%，而且在各期的肺癌中的特异性均在96%。在II-IV期和所有分期的肺癌中，根据ROC曲线计算出的AUC分别为0.99和0.95，所以CAPP-Seq具有强大的检测能力。临床资料表明，ctDNA比例低至0.019%的时候也还能够被CAPP-Seq检测到。;研究者用CAPP-Seq测定的ctDNA的水平和肿瘤体积（肿瘤体积用CT和PET评估测定）之间存在显著相关性（p=0.0002，R2=0.89），除了几例I期肺癌患者的肿瘤体积明显高于其ctDNA相对应的大小。随访研究发现ctDNA水平随着疾病进展和相应的治疗，也在不断变化。对10例样本（7例阳性和3例阴性）进行了肿瘤标本（侵入性的活检）和血液标本（非侵入性的CAPP-Seq检测）在筛查和基因型（EGFR和KRAS）检测中的对比，结果发现CAPP-Seq并不比金标准肿瘤活检的检测效能差，能够准确测定肺癌的基因型。;ctDNA中PI3KCA的检测可用于预测 原发性乳腺癌患者的预后; 循环肿瘤细胞指从实体瘤中脱离出来并进入外周血液循环的肿瘤细胞。;18;CTC的临床应用方向;用两种不同的方法检测CTC以评估非小细胞肺癌患者的预后;放疗前，65%患者检出CTC， 平均检出率9.1CTCs/ml ，明显高于放疗后的CTC平均数（0.6个）。有1名在放疗后CTC明显未降低的患者，出现远端转移。 ;CTC可作为慢性阻塞性肺炎（COPD）患者肺癌早期诊断的新的标志物;CTC v.s. ctDNA—互相排斥还是互为补充？;ctDNA及CTC检测与NSCLC的靶向治疗疗效的相关性;文章主要通过数字PCR比较CtDNA、肿瘤标记物及循环肿瘤细胞三个方法的比较，其中CtDNA灵敏度为97%，循环肿瘤细胞87%，肿瘤标记物灵敏度为78%， 。;与肿瘤标志物检测相比，CTC及ctDNA检测更能反映病情的进展。 ;“液态活检” 的检测技术越来越丰富，“液态活检”研究将会给临床诊断带来革命性的突破； “液态活检”是现有病理检测技术的必要和有效的补充； “液态活检”的准确性有待??多的临床数据进一步确认； 病理科室理应成为“液态活检”的领军科室。