酶解制备鱼鳞蛋白降血压肽的工艺优化.PDFVIP

核 农 学 报　 ２０１９ꎬ３３(１):０１２０~０１２８ １２０ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＮｕｃｌｅａｒＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ 文章编号:１０００￣８５５１(２０１９)０１￣０１２０￣０９ 酶解制备鱼鳞蛋白降血压肽的工艺优化 １ １ꎬ∗ １ １ꎬ２ꎬ∗ 涂　 丹　 张益奇 　 叶　 繁　 戴志远 １ ２ ( 浙江工商大学海洋食品研究院ꎬ浙江 杭州　 ３１００３５ꎻ 浙江省水产品加工技术研究联合重点实验室ꎬ浙江 杭州　 ３１００３５) 摘　 要:为有效利用鱼鳞制备降血压肽ꎬ以罗非鱼鱼鳞为原料ꎬ在 １２１℃条件下进行热预处理 １５ ｍｉｎ后ꎬ 运用响应面分析法优化酶解制备鱼鳞蛋白ＡＣＥ抑制肽的工艺条件ꎮ 结果表明ꎬ以水解度和ＡＣＥ抑制 率为评价指标ꎬ筛选出碱性蛋白酶为最优酶ꎮ 在单因素试验的基础上ꎬ根据 Ｂｏｘ￣Ｂｅｈｎｋｅｎ 中心组合试验 设计原理ꎬ最终确立最优的酶解工艺参数为:酶解时间２ ｈ、酶解温度５６３℃、ｐＨ值８０ꎬ酶底比１１％ꎬ 此条件下ＡＣＥ抑制率理论值为８７９５％ꎬ实际值为８８２６％ꎮ 最优条件下制得的酶解产物相对分子质量 集中在３００~３０００ Ｄａ之间ꎬ水解效果较好ꎮ 本研究结果对酶解法制备鱼鳞蛋白降血压活性肽具有一定 的实践参考价值ꎮ 关键词:鱼鳞ꎻ响应面分析法ꎻ酶解ꎻ降血压肽 ＤＯＩ:１０１１８６９/ ｊ.ｉｓｓｎ.１００￣８５５１２０１９０１０１２０ 　 　 目前ꎬ治疗高血压的化学合成降压药物有卡托普 ~７０％)ꎬ但并未得到很好的开发利用ꎮ 据不完全统 [８] 利、依那普利等ꎬ这些药物的降血压效果显著ꎬ但需要 计ꎬ我国每年废弃的鱼鳞达３０万ｔ ꎬ造成了极大的资 长期服用ꎬ且有一定的副作用ꎬ如引起咳嗽、丧失味觉、 源浪费和环境污染ꎮ 目前ꎬ采用鱼源蛋白制备ＡＣＥ抑 － － [１ ２] 制肽的研究ꎬ多以鱼皮为原料[９ １０] ꎬ而以鱼鳞为原料制 肾脏损伤等 ꎬ因此ꎬ研发更加安全、高效的降压药 物ꎬ对高血压的预防和治疗显得尤为必要ꎮ 血管紧张 备ＡＣＥ抑制肽及其纯化、结构分析等方面也已经开展 素转换酶(ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｏｎ ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅꎬＡＣＥ)是一种 了一系列工作ꎮ 与鱼皮相比ꎬ鱼鳞结构更为致密ꎬ其丰 膜结合的含锌二肽羧基肽酶ꎮ 它能够催化血管紧张素 富的Ⅰ型胶原主要分布在鱼鳞内层ꎬ外层被羟基磷灰 Ⅰ转化成具有强烈血管收缩作用的血管紧张素Ⅱꎬ同 石覆盖ꎬ这些抗性屏障使得鱼鳞难以被降解ꎬ通常需要 － [１１ １２] [１３] 时能使具有血管扩张作用的缓激肽失活ꎬ导致血压上 加大酶使用量(６％左右) 或延长酶解周期 制 － [３ ５] 备胶原蛋白肽ꎮ