第21章真核基因表达调控陈娟.pptVIP

第 三 节 真核基因表达的转录水平调控 Transcriptional Regulation of Eukaryotic Gene Expression 一、转录起始调控发生在转录起始复合物的组装过程 ①基因活化蛋白质； ②通用转录因子； ③辅助激活子(coactivator)和/或中介子（medicator） RNA聚合酶II与启动子的结合、启动转录需要诸多蛋白质因子的协同作用： TATA盒 TF IID RNA聚合酶II 通用转录因子 转录方向 中介子 活化蛋白 活化蛋白 增强子 增强子 DNA TF IIA 5?加帽的作用在于： ①有助于保护mRNA免于被核糖核酸酶降解； ④5?帽结合蛋白复合体参与mRNA和核糖体的结合来起始翻译 。 ③促进mRNA从细胞核运输到细胞浆； ②协助mRNA的剪接。在剪接第一个外显子时，剪接体的形成需要帽结合蛋白的参与； （一）mRNA 5′端加帽和3′端加尾修饰 利于mRNA稳定性和转运 二、转录后调控涉及修饰、剪接、编辑、定向转运多个环节 poly(A)尾可结合一种或多种特殊蛋白，避免mRNA被酶降解，并在翻译过程中具有重要作用。 poly(A)尾的作用： 初始转录本含有所有选择性加工途径所需要的分子信号。 一种细胞偏好何种选择性加工途径取决于加工因子——RNA结合蛋白的特异性。 选择性剪接可以被正负调节分子调节： （二）可变性剪接可使初始转录本产生不同的成熟mRNA （三）编辑加工可增加mRNA分子信息的内涵 （四）调解成熟mRNA的核外输出也会 影响基因表达 （五）某些mRNA定位于细胞质的特殊区域 mRNA分子的3种不同定位过程 IRE-BP对转铁蛋白受体mRNA稳定性的调节 低铁状态 转铁蛋白受体 mRNA 5’ 编码区 活化的IRE-BP 3’ Poly(A)n 翻译 TfR蛋白 IRE 高铁状态 转铁蛋白受体 mRNA 5’ 编码区 铁 失活的IRE-BP 3’ Poly(A)n mRNA降解 IRE （六）通过改变mRNA分子的稳定性调控基因表达 （七）mRNA分子细胞质中添加Poly(A) 控制蛋白翻译 在一些情况下，特殊的Poly(A)尾端可以在细胞浆得以延伸。 （八）无义变化介导的mRNA降解是真核mRNA的监视系统 700bp左右RNA前体 配对碱基 DICER 20~25bpmiRNA 5’ RISC 靶mRNA 未配对区域 靶mRNA降解 导入的双链RNA片段 siRNA RDE-1 DICER RISC RISC RISC 5’ 靶mRNA 靶mRNA被核酸内切酶切割 靶mRNA被核酸外切酶降解 （九）RNA干涉是一种基因转录后沉默机制 第 四 节真核基因表达的翻译水平调控Translational Regulation of Eukaryotic Gene Expression 一、翻译起始因子-2的磷酸化调节 蛋白质翻译 条件变化活化了特殊的蛋白质激酶，使翻译起始因子eIF-2（eukaryotic initiation factor，eIF-2）磷酸化所致。 二、5′端或3′端非翻译区特异RNA 结合蛋白介导蛋白质翻译负调控 一些转录抑制蛋白质结合到mRNA的5?端抑制转录起始，而另一些抑制蛋白质则识别特殊mRNA分子的3?UTR，通过干扰3?Poly(A)尾与5?端帽的联络而减少翻译的启动。 IRE-BP对铁蛋白mRNA翻译的调节 低铁状态 5’ 铁蛋白mRNA 活化的IRE-BP 编码区 3’ 翻译不能进行 高铁状态 5’ 铁蛋白mRNA 失活的IRE-BP 铁 编码区 3’ 翻译 三、真核mRNA不同翻译起始点的调控 在一些情况下，细胞可以通过易遗漏扫描调节相关蛋白质的相对丰度。 上游开放阅读框架与正常的开放阅读框架不一致，翻译后很快会遇到终止密码子而释出无功能的多肽。 其调节功能，竞争扫描核糖体起始复合物，使正常翻译维持在较低水平。 目 录 目 录 Regulation of Gene Expression in Eukaryotes 第二十一章 真核基因表达调控 第 一 节 真核基因表达调控的特征 Features of Eukaryotic Gene Regulation 一、顺式作用元件是决定真核基因转录活性的关键因素之一 顺式作用元件: ——可影响自身基因表达活性的DNA序列 顺式作用元件分三类：启动子 增强子 沉默子 exon1 intron1 exon n intron n 上游 下游 转录起始点