课件20-RNA转录-李恩民.PPT

目 录 目 录 目 录 DNA依赖的RNA合成 DNA-Dependent RNA Synthesis 李恩民 原料：NTP (ATP、UTP、GTP、CTP) 模板：单链DNA 酶：RNA聚合酶(RNA polymerase, RNA-pol) 其他：蛋白因子、Mg2+、Zn2+ 等 RNA合成方向为5’?3’ 产物的序列与模板链互补 依赖DNA的RNA合成体系 一、RNA转录由DNA依赖的RNA聚合酶催化 复制与转录的区别 复制 转录 模板 DNA双链 DNA的一条链 原料 dNTP (N=A/G/C/T) NTP(N=A/G/C/U) 引物 需要 不需要 酶 DNA聚合酶 RNA聚合酶 产物 两条DNA链 一条RNA链 范围 基因组全长 基因组局部区段 配对D-D/R A-T/T-A/C-G/G-C A-U/T-A/C-G/G-C 图17-3 DNA依赖的RNA聚合酶催化的RNA合成机制，350页 Asp (NMP)n + NTP ? (NMP)n+1 + PPi （一）RNA聚合酶不需要引物能直接启动RNA链的合成 OH OH OH OH ?? ? ? ? ? ? （二）原核生物只有一种RNA聚合酶 注释：核心酶 (core enzyme，?2???)，RNA链延长。 RNA合成无监控较读，错配率较高。 全酶 (holoenzyme) 大肠杆菌的RNA聚合酶 催化形成核糖磷酸酯健 利福平 结合DNA模板 识别启动子 调控转录速率 功能不祥 45s-rRNA(28S, 18S, 5.8S) RNA polymeraseⅠ RNA polymeraseⅡ*，hnRNA(mRNA), a part of snRNA 5s-rRNA, tRNA, a part of snRNA RNA polymerase Ⅲ very sensitive less sensitive resistant ?-amanitine ?-鹅膏蕈碱 cyclic octapeptide （三）真核生物有三种RNA聚合酶 (核仁) (核质) (核质) 人类的三种RNA聚合酶 pol Ⅰ(500~700kD) pol Ⅱ(500~700kD) pol Ⅲ(500~700kD) POLR1A 194kD, 02p11.2 POLR2A 220kD, 17p13.1 POLR3A 155kD, 10q22-q23 POLR1B 128kD, 02q13 POLR2B 140kD, 04q12 POLR3B 127.6 kD, 12q23.3 POLR1C 30kD, 06p21.1 POLR2C 33kD, 16q13-q21 POLR3C 62kD, 01q21.1 POLR1D 16kD, 13q12.2 POLR2D 16kD, 02q21 POLR3D 44kD, 08q21 POLR1E 53kD, 09p13.2 POLR2E 25kD, 19p13.3 POLR3E 80kD, 16p12.2 POLR2F 14.4kD,22q13.1 POLR2F 14.4kD,22q13.1 POLR2F 14.4kD, 22q13.1 POLR2G 19kD, 11q13.1 POLR3G 32kD, 05q14.3 POLR2H 17.1kD,03q28 POLR2H 17.1kD,03q28 POLR2H 17.1kD, 03q28 POLR3H 22.9kD, 22q13.2 POLR2I 14.5kD,19q12 POLR2J 13.3kD,07q22.1 POLR2K 7.0kD, 08q22.2 POLR2K 7.0kD, 08q22.2 POLR2K 7.0kD, 08q22.2 POLR3K 12.3kD, 16p13.3 POLR2L 7.6kD, 11p15 POLR2L 7.6kD, 11p15 POLR2L 7.6kD, 11p15 相当于原核RNA聚合酶的??, 结合模板DNA, 其羧基末端结构域CTD(carboxyl terminal domain)：共有序列/Y*S*PT*S*PS*×21/52, 其磷酸化修饰参与转录起始调控. 相当于原核RNA聚合酶的 ?, 结合NTP 相当于原核RNA聚合酶? Coding region (一) 原核RNA聚合酶通过?亚基识别转录起始点，启动转录 二、 RNA聚合酶结合启动子启动转录 TATAAT ATATTA +1 TTGACA AACTGT UP element -35 Box -10 Box -40