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酶-生物化学与分子生物学教研室
第 三 章 酶 酶学研究简史 公元前两千多年,我国已有酿酒记载。 1877年,Kuhne首次提出Enzyme一词。 1897年,Buchner兄弟用不含细胞的酵母提取液,实现了发酵。 1926年,Sumner首次从刀豆中提纯出脲酶结晶。 酶的概念 目前将生物催化剂分为两类 酶 、 核酶(脱氧核酶) 第一节酶的分子结构与功能The Molecular Structure and Function of Enzyme 酶的不同形式 多功能酶(multifunctional enzyme)或串联酶(tandem enzyme):一些多酶体系在进化过程中由于基因的融合,多种不同催化功能存在于一条多肽链中,这类酶称为多功能酶。 一、 酶的分子组成 结合酶 (conjugated enzyme) 二、酶的活性中心 活性中心内的必需基团 一些酶活性中心的氨基酸残基 酶 残基总数 活性中心残基 牛胰核糖核酸酶 124 His12, His119, Lys41 溶菌酶 129 Asp52, Glu35 牛胰凝乳蛋白酶 245 His57, Asp102,Ser195 牛胰蛋白酶 238 His46, Asp90, Ser183 木瓜蛋白酶 212 Cys25, His159 弹性蛋白酶 240 His45, Asp93, Ser188 枯草杆菌蛋白酶 275 His46, Ser221 碳酸酐酶 258 His93-Zn-His95 His117 三、 同工酶 第二节 酶的工作原理 酶与一般催化剂的共同点 在反应前后没有质和量的变化; 只能催化热力学允许的化学反应; 只能加速可逆反应的进程,而不改变反应的平衡点。 (一)酶促反应具有极高的效率 一种酶仅作用于一种或一类化合物,或一定的化学键,催化一定的化学反应并生成一定的产物。酶的这种特性称为酶的特异性或专一性。 根据酶对其底物结构选择的严格程度不同,酶的特异性可大致分为以下3种类型: 绝对特异性(absolute specificity):只能作用于特定结构的底物,进行一种专一的反应,生成一种特定结构的产物 。 酶促反应具有极高的效率 酶促反应特点 酶促反应具有高度的特异性 酶促反应的可调节性 中间产物和诱导契合学说 酶促反应机制 邻近效应、张力效应 多元催化、表面效应 第三节 酶促反应动力学 Kinetics of Enzyme-Catalyzed Reaction 概念 研究各种因素对酶促反应速度的影响,并加以定量的阐述。 影响因素包括有 酶浓度、底物浓度、pH、温度、 抑制剂、激活剂等。 一、底物浓度对反应速度的影响 单底物、单产物反应 酶促反应速度一般在规定的反应条件下,用单位时间内底物的消耗量和产物的生成量来表示 反应速度取其初速度,即底物的消耗量很小(一般在5﹪以内)时的反应速度 底物浓度远远大于酶浓度 (一)米-曼氏方程式 推导过程 稳态:是指ES的生成速度与分解速度相等,即 [ES]恒定。 K1 ([Et]-[ES]) [
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