热带亚热带植物微繁殖 郑成木.pdfVIP

绪 论 一 、植物组织培养 的概念 年 ， 提出了一种新的植物培养方式，称之为胚培养 （ 。他 将 几种十字花科（ ）植物的胚剥离下来，并在离体（ 的条件下得到成活的植株 。 从 年起，许多植物培养方法得到发展 ，如体外播种兰花种子、愈伤组织培养 （ 、器官培养（ ）等 。 年后，种种不同的培养都划归到植物组织培养名下， 所 以，广义 的植物组织培养（ ）包括了多种离体培养（ ）技术 ， 即在无菌条件下，在营养培养基上对离体 的植物器官、组织 、细胞和原生质体 ，甚至包括完 整植株所进行 的培养 。其主要特征是 ：①一般在玻璃培养器皿 （试 管 、培养皿 、三角烧瓶 等 ）中进行 ；②培养环境排除了微生物如病毒、细菌和真菌 ，以及植物害虫如 昆虫和线虫侵 入的可能，保持无病 、无菌、无虫害的生长条件 ；③各种环境条件如营养因子、激素因子 ，以 及光照、温度等物理因子处于人工控制之下 ，并可达到最适水平 ；④通常打破 了正常的植物 发育路线和格局 ；⑤随着单细胞和原生质体培养技术 的发展 ，对植物体显微结构进行操作成 为可能，并为遗传操作奠定了重要基础 。 二 、植物组织培养 的分类 由于植物组织培养所采用 的培养基 、培养材料 、培养方法和培养 目标 的不 同，因而可 以 划分为种种不 同的类型 。例如 ，根据培养基 固化程度 的不 同，可分为 固体培养 （一般采用琼 脂固化培养基 ）、半液半固体培养和液体培养 。液体培养按培养方法又可分为振荡培养、旋转 培养和静置培养等 。如果在液体培养基 中放入滤纸作为培养物 的支持物 ，则可称之为纸桥培 养 。根据培养材料不 同，可分为 ：①完整植株培养 。②胚胎培养 。③器官培养 ，包括花序培 养 ，花器官 （子房、胚珠及胎座组织、雌雄蕊、花萼和花冠）培养，根 （尖 ）、茎 （尖 ）、叶、 果实种子及其切段或原基 的培养 。④组织培养 ，包括 （茎尖 ）分生组织 、薄壁组织 、输导组 织 、胚乳组织等的培养 ，以及对 由各种外植体诱导形成 的愈伤组织的培养 。愈伤组织培养也 称狭义的 “组织培养”。⑤细胞培养 ，包括从活体组织上游离分散性较好的细胞或微细胞团的 培养 ，也称为 （细胞 ）悬浮培养。 原生质培养（ ）和体细 胞杂交 ，包括 对 去 掉细胞壁 的细胞原生质体培养及杂种细胞原生质体 的培养 。在单细胞培养 中，可 以采用看护 培养、平板培养和微室培养三种方法 。 三 、植物组织培养 的用途 植物组织培养的用途可分为四大类：首先可 以对植物体进行无性快速繁殖 （即微繁殖 ）。 第二是大规模细胞培养可以用来生产次生代谢物质 （如医药、香料等植物化学成分 ）。第三是 用于育种 ，如花药花粉培养产生单倍体 ；胚乳培养产生三倍体 ；胚培养挽救杂种胚 ；原生质 体培养进行体细胞杂交，以及植物组织培养用于突变体筛选和遗传操作 ；离体种质保存等 。第 四是用于理论研究，如植物组织培养用于植物生理学、病理学、 （比较 ）胚胎学、细胞与分子 生物学等 的研 究 。 四、植物组织培养发展简史 植物组织培养的发展可追溯到 世纪 。 和 ）提出细胞学说（ ）及细胞全能性理论 。细胞全能性理论认为 ，每一个细胞都是一个 自主 的基本 的有机体 ，原则上具备再生完整植株 的能力 。细胞全能性理论 已成为植物细胞和 组织培养 的理论基础 。 年 ，德 国植物生理学家 第一次尝试采用植物组织培养技术 ，对小野芝麻、 凤眼兰 的叶肉组织，以及万年青属植物 的表皮细胞等进行培养 ，但未能诱导细胞分裂 。 年， 首次在培养基上对十字花科 的萝 卜和辣根菜的胚培养获得成功 。 年， 进行了植物原生质体的融合工作，但未能培养成活 。 年， 将兰花种子在离体