常规病理染色技术.pdf

常规病理染色技术 云南省第三人民医院病理科 徐开军 病理制片的质量直接影响 病理诊断的准确性 Page 2 HPV16 要求： 抗酸染色 ①各步骤流程合理 ②规范化的技术操作 HE染色 ③高度的责任心 Page 3 染色中的基本原则 一、染色前的处理（脱蜡至水） 石蜡切片须经二甲苯脱蜡、梯度乙醇至水洗。 二、染色 苏木精染细胞核、分化、蓝化、伊红染细胞浆 三、染色后的处理（脱水透明） 1.染色后的脱水：由低浓度向高浓度乙醇逐级过度， 保证脱水彻底。 Page 4 2.脱水后的透明 四、封固 1.甘油明胶封固剂：脂肪染色的标准封固剂。 2.中性树胶封固剂：最常用封固剂。 Page 5 一、染料的性质 染料具有染色能力须具备的条件： ①本身具有颜色，即其分子结构中要含发色团。 ②与被染组织有亲和力，即其分子结构中要含有助色团。 同时具备这两个条件的化合物才能做染料 掌握常用染色原理 Page 6 （一）苏木精染色原理 苏木精被氧化呈苏木红 苏木红与媒染剂结合 铝-苏木红色淀与 胞核内磷酸根结合 Page 7 （二）伊红染色原理 水溶性伊红Y在水中离解 伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴 离子，与蛋白质的氨基正电荷（阳离子）结合而使细胞质、红细 胞、结缔组织等物质染成不同程度的红色或粉红色。 Page 8 （三）苏木精的氧化 1.自然氧化（成熟氧化） 暴露在阳光和空气中，这个过程比较缓慢，约需3- 4个月，但染液可使用较长时间。 2.化学氧化 采用氧化剂（如氧化汞、碘酸钠、高锰酸钾等）使 染液立即被氧化成熟。这种苏木精配制后即可使用。 化学氧化苏木精较自然氧化的寿命要短。 Page 9 1g苏木精所需氧化剂的量： 氧化汞 100mg 碘酸钠 40-100mg 高锰酸钾 90mg 高碘酸钠 35mg 碘 200mg 高碘酸钾 50mg Page 10 在几种氧化剂中，碘酸钠为首选氧化剂，其优点是在 室温下易溶于水，无需加热，稳定性好。 理论上，1g苏木精（3水）被完全氧化成苏木