液相色谱仪间核查作业指导书.docxVIP

1目的 对高效液相色谱仪运行情况进行检查，保证其正常使用，确保检验数据准确可靠。 2范围 适用于本公司高效液相色谱仪在两次检定之间或修理后的运行检查。 3职责 3.1检测中心液相主要使用人负责液相色谱仪期间核查的准备工作、操作及记录。 3.2检测中心设备管理员负责统筹安排及记录归档。 4计量性能要求 4.1 输液系统 泵流动稳定性应符合表1的要求。 表1 泵流量稳定性SR的指标要求 泵流量设定值（mL/min） 0.2~0.5 0.6~1.0 大于1.0 测量次数 3 3 3 流动相收集时间/min 20~10 10~5 5 泵流量稳定性SR 3% 2% 2% 4.2 检测器 仪器的检测器的主要技术指标见表2。 表2 液相色谱仪检测器的主要技术指标 检测器 项目 紫外-可见光检测器 二极管阵列检测器 荧光检测器 示差折光率检测器 基线噪声 ≤5×10-4AU ≤5×10-4FU ≤5×10-6RIU 基线漂移 ≤5×10-4AU/30 min ≤5×10-3FU/30min ≤5×10-6RIU/30min 注：①若仪器的输出信号用mV或V表示，注意查看仪器说明书或仪器标牌标明的其与AU（FU）的换算关系；若无特殊标明通常可按照1V=1AU（FU）进行换算。 4.3 整机性能 仪器的整机性能用定性定量测量重复性表示，指标要求见表3。 表3 液相色谱仪整机性能指标要求 检测器 项目 紫外-可见光检测器 二极管阵列检测器 荧光检测器 示差折光率检测器 定性重复性 ≤1.0% ≤1.0% ≤1.0% 定量重复性 ≤3.0% ≤3.0% ≤3.0% 5 通用技术要求 5.1 仪器外观 仪器上应有仪器名称、型号、制造厂名、产品系列号、出产日期等内容的标牌，国产仪器应有制造计量器具许可证标志。 5.2 仪器电路系统 仪器电源线、信号线等插接紧密，各开关、旋钮、按键功能正常，指示灯灵敏，显示器清晰。 6 计量器具控制 计量器具控制包括：两次检定之间或大修（修理更换泵、光路等）后的运行检查。 6.1 核查条件 6.1.1 环境条件 6.1.1.1 核查室应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，通风良好。 6.1.1.2 室温（15—30）℃，检定过程中温度变化不超过3℃（对示差折光率检测器，室温变化不超过2℃），室内相对湿度20%—85%。 6.1.1.3 仪器应平稳的放在工作台上，周围无强烈机械振动和电磁干扰源，仪器接地良好。 6.1.1.4 电源电压为（220±22）V，频率为（50±0.5）Hz。 6.1.2 核查设备 6.1.2.1 秒表：最小分度值不大于0.1s。 6.1.2.2 分析天平：最大称量不小于100g，最小分度值不大于1mg。 6.1.2.3 数字温度计：测量范围为（0—100）℃，最大允许误差为±0.3℃。 以上器具需经计量检定合格。 6.1.3 其他要求 6.1.3.1 核查用试剂：色谱级甲醇，纯水，分析纯的丙酮和异丙醇，紫外分光光度计，萘-甲醇溶液1.00×10-4g/ml和1.00×10-7g/ml，甲醇中胆固醇溶液200μg/ml和500μg/ml和胆固醇等。 6.1.3.2 注射器：10μL，50μL和10mL各一支。 6.1.3.3 容量瓶：50mL，10个。 6.2 核查方法 6.2.1通用技术要求 按5.1和5.2的要求，目视、手动检查。 6.2.2 输液系统 泵流量稳定性SR 按表1的要求设定流量，启动仪器，压力稳定后，在流动相出口处用事先称重过的洁净容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集表1规定时间流出的流动相，在分析天平称重，按公式（1）计算SR。每一设定流量，重复测量3次。 Fmax-Fmin SR= ———————×100% (1) Fm 式中： Fmax——同一设定流量3次测量值的最大值，mL/min; Fmin——同一设定流量3次测量值的最小值，mL/min。 Fm=(W2-W1)/（ρt·t） (2) 式中： Fm——流量实测值，ml/min； W2——容量瓶＋流动相的质量，g； W1——容量瓶的质量，g； ρt——实验温度下流动相的密度,g/cm3（不同温度下流动相的密度参见附录C） t——收集流动相的时间，min。 6.2.3 紫外-可见光检测器和二极管阵列检测器的性能 基线噪声和基线漂移 选用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，紫外检测器的波长设定为254nm,检测灵敏度调到最灵敏档。开机预热，待仪器稳定后记录基线30min，选取基线中噪声最大峰-峰