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江西农业大学学报 20 10 , 32 ( 3) : 0595 - 0600 h ttp : / / xuebao. jxau. edu. cn
A cta A gricu ltu rae U n iversitatis J iangxien sis E - m ail: ndxb7775@ sina. com
正交设计优化辣椒 SRAP - PCR反应体系
及引物筛选
1, 2 1 1 1 3
周坤华 ,方 荣 ,陈学军 ,缪南生 ,王悟亮
(
1. 江西省农业科学院 蔬菜花卉研究所 ,江西 南昌 330200; 2. 江西省农业科学院 油料作物重点实验室 ,江西 南
昌 330200; 3. 江西省农业科学院 ,江西 南昌 330200)
( 5 ) (
摘要 : 以辣椒基因组 DNA 为模板 ,采用 L16 4 正交试验设计 ,对 SRA P反应体系中的 5种关键因素 Taq DNA
2 + )
聚合酶 、M g 、dN TP s、引物 、模板 DNA 进行优化 ,结果表明 ,辣椒 SRA P - PCR 最佳反应体系为 : Taq DNA 聚合
2 +
μ μ
酶 0. 75 U 、M g 0. 6 mmo l/L、dN TP s 0. 2 mmo l/L、引物 0. 8 mol/L、模板 DNA 50 ng,总体积为 10 L 。运用该
体系对辣椒 3份种质材料进行验证 ,证明该体系稳定可靠 ,并从 198 个 SRA P 引物组合中筛选出扩增条带清
晰、多态性丰富的 35个引物组合 。该体系的建立与多态性引物组合的筛选为 SRA P标记技术在辣椒分子遗传
学中的应用提供科学依据 。
关键词 :辣椒 ; SRA P;正交设计 ;体系优化 ; 引物筛选
中图分类号 : S64 1. 3 文献标志码 : A 文章编号 : 1000 - 2286 (20 10) 03 - 0595 - 06
O ptim iza tion of SRAP - PCR Sy stem in Pepper
Using O rthogona l D esign and Selection of Pr im ers
1, 2 1 1
ZHOU Kunhua , FAN G Rong , CH EN Xuejun ,
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