药毒毒理学ppt课件.ppt

二、干扰有丝分裂 * 1.秋水仙碱效应 2.核内复制 3.异常纺锤体形成 4.染色体不浓缩或黏着性染色体 5.染色体提前凝缩 秋水仙碱、灰黄霉素、长春新碱 与微管结合蛋白 结合 微管解聚 抑制细胞分裂 出现多倍体 * [给药剂量及途径] 给药组设高、中、低三个剂量；高剂量应能产生轻微毒性反应，如体重增长缓慢等，但不应出现严重中毒或死亡。 给药途径应尽量接近临床。 [给药时间] 雄性动物交配前给药60 ~ 80天，雌性动物连续给药14天，交配后继续给药至大多数器官发生期（大鼠/小鼠为孕后13天）。 * [检查] 1.雄性与雌性动物同笼交配后，每日检查小鼠阴道中有无阴栓，大鼠则检查精子，以检查到阴栓或精子的当日作为妊娠第0天。 2.雌鼠于妊娠第13天、雄鼠于交配成功后处死。 确定妊娠、胎儿的吸收和死亡情况； 母鼠的一般状况、体重变化和胎盘重量； 确定子宫内的活胎数，对活胎进行性别鉴定、体重和身长的测量以及外表和内脏器官的形态学观察，必要时进行组织学和组织化学的详细检查。 * [结果判定] 致畸试验 [原理] 母体在孕期受到可通过胎盘屏障的药物作用,影响胚胎的器官发育,导致结构和机能的缺陷,出现胎仔畸形。因此在受孕动物的胚胎着床后，并已开始进入细胞及器官分化期时，可检出该物质对胎仔的致畸作用。 致畸试验（teratogenic test）为鉴定动物致畸物的标准方法。不仅能检测到药物的致畸性，也可得到有关药物致胚胎死亡及生长迟缓的资料。 第五节 致畸试验 [动物] 要求选用对药物敏感性高而自发畸形率低的动物，常用大鼠、小鼠和兔。一般至少采用2种动物，一种为啮齿类，另一种要求非啮齿类（狗和猴）。 [动物受孕及检查方法] 未交配过的雌鼠，鼠龄3 m以下，体重200 - 250 g，做阴道分泌物涂片检查，若发现白色分泌物较多，镜下发现有核上皮细胞，则提示大鼠处于动情前期。此时，将其与雄鼠按2∶1 或3∶2同笼过夜，次日检查是否受孕。 检查是否受孕。（1）检查阴栓：阴栓是雄鼠精囊与凝固腺分泌液在雌鼠阴道凝结而成的白色块状物，形似米粒。大鼠阴栓易脱落，小鼠阴栓不易脱落。（2）阴道涂片检查精子。 阴栓或精子检出当日记为孕0天，次日为孕第1天。 第五节 致畸试验 [剂量分组] 分组 分高、中、低三个剂量组；阴性对照组；阳性对照组。 剂量确定 （1）高剂量应有母体毒性反应，或为最大给药量；低剂量组应为母体和胚胎毒性反应剂量。 （2） 以 LD50 的 1/3 ~ 1/5 为高剂量组；以 LD50 的 1/30 ~ 1/100 为低剂量。 （3） 以人实际接触量做为低剂量组，并以其倍数（10倍）做为高剂量。 每组受孕动物数 大鼠、小鼠 15 - 20 只；兔 8 -10 只；狗和猴 3 - 4 只。 第五节 致畸试验 [给药方式及时间] 给药途径根据药物的性质及人类可能的接触方式定，多为灌胃和腹腔注射。 给药时间选在胚胎对致畸物的易感期（器官形成期）。 第五节 致畸试验 [观察指标] 1 每只实验动物在试验期间的受精日期、给药日期和剂量、体重等基本指标。 2 对母体的观察：每天检查有无中毒症状，对有流产或早产征兆者（阴道出血）及时处死检查。 3 对胎仔的观察 A 活仔外形的检查 B 胎仔内脏检查 C 对胎仔骨骼检查 第五节 致畸试验 [结果评定] 1 对母体动物评定： ×100 % ×100 % 母体畸胎出现率（%）= 妊娠母体数 交配率% = 已交配动物数 实验动物数 死亡率% = 死亡动物数 实验动物数 出现畸形胎的母体数 ×100 % 母体增重= 处死时母体体重 – 妊娠第6日体重 – 处死时子宫连胎重 第五节 致畸试验 [结果评定] 2 对胎仔评定： ×100 吸收胎率（% ）= 早期吸收数 + 中期吸收数 + 晚期吸收数 实验动物数 注意区分畸形数和畸胎数 外观畸形率% = 外观畸形数 检查胎仔数 ×100 % 骨骼畸形率% = 骨骼畸形数 检查骨骼数 ×100 ×100 死胎率（%）= 胎仔总数 死胎数 内脏畸形率