吉林省伊通满族自治县高中生物第一章基因工程1.1DNA重组技术的基本工具课件新人教版选修3.pptVIP

1.1 DNA重组技术的基本工具 能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮？ 能否让细菌“吐出”蚕丝？ 能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？ 一、基因工程的概念 基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 结果 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的基因产物 剪切 →拼接 →导入 →表达 理论基础 DNA是遗传物质的发现 DNA双螺旋结构的确立 遗传信息传递方式(中心法则)的认定 技术保障 基因工程工具 的发现和应用 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 基因载体(如质粒) 二、基因工程的诞生 提取 抗虫基因 棉花细胞 苏云金芽孢杆菌 (有抗虫特征) 普通棉花 (无抗虫特征) 与运载体DNA拼接，导入 (含抗虫基因) 棉花植株 (有抗虫特征) 基因工程培育抗虫棉的简要过程 如何将苏云金芽孢杆菌细胞内的抗虫基因从它的DNA分子中切割下来？ 如何将切下来的抗虫基因与运载体DNA连接起来？ 如何将重组的DNA运送到棉花细胞？ 需要切割DNA的工具（分子手术刀） 需要连接DNA片断的工具 （分子缝合针） 需要基因转移的工具（分子运输车） ——限制性核酸内切酶 ——DNA连接酶 ——基因载体 工具酶 思 考 1、限制性核酸内切酶（简称限制酶） 能够识别和切割DNA分子内一小段特殊核苷酸序列的酶。 含义： 主要从原核生物中分离得到 来源： 磷酸与脱氧核糖之间的磷酸二酯键 作用部位： 有专一性。即一种限制酶只能识别一种特定核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。 作用特点： 产生黏性未端 作用结果： 三、基因工程的基本工具 EcoRI A A G T T C C T T A A G C T T A A G G A A T T C 识别GAATTC序列，并在G和A之间切开 限制酶在切断DNA时，可在切口处带有几个伸出的核苷酸，他们之间碱基正好互补配对，因此称这些片断为黏性末端。 回文序列 A A T T G C C T T A A G 3’ 5’ 3’ 3’ 5’ 5’ 5’ 3’ 磷酸二酯键 SmaⅠ C C C G G G G G G C C C 识别CCCGGG序列，并在G和C之间切开 限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 C C C G G G G G G C C C A A T T G C C T T A A G 3’ 5’ 3’ 3’ 5’ 5’ 5’ 3’ 序号 限制酶 识别序列 切割位点 ?切割DNA片段 ① SmaⅠ GGGCCC G↓C ?GGGCCC CCCGGG ② BamHⅠ GGATCC G↓G ?GGATCC CCTAGG ③ Sau3A GATC ↓GATC ?GGATCC CCTAGG ④ HindⅢ AAGCTT A↓A AAGCTT TTCGAA 请画出这几种DNA片段被对应的限制酶切割后的结果。 2、不同限制酶的识别序列和切割位点不同，这一点体现出酶的什么特性？ 1、不同的限制酶切割DNA形成的黏性末端一定不同吗？ 要想获得某个特定性状的基因必须用限制性核酸内切酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ 切两个切口，产生四个黏性末端。 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端。 思 考 C G G C C G T A T A A T A T G C G C G C T A A T C G T A T A A T A T G C T A T A EcoRI EcoRI C G G C C G T T A A A A T T G C G C G C T A A T C G T T A A A A T T G C T A T A C G G C C G T T A A A A T T G C T A T A 2、DNA连接酶 两条链的骨架部分，形成磷酸二酯键 C G G C C G T T A A A A T T G C T A T A 三、基因工程的基本工具 1、作用部位： 2、种类： 两类 E·coli DNA连接酶(大肠杆菌) T4 DNA连接酶 （T4噬菌体） 3、两种连接酶的作用 T4 DNA连接酶 种类 作用 E·coli DNA连接酶 连接黏性末端 连接黏性末端和平末端（效率低） 辨析