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实验技术三 细的单染色法
实验技术三 细菌的单染色法 一、实验目的 学习微生物涂片、染色的基本技术； 掌握细菌的单染色法； 初步学会无菌操作技术； 巩固显微镜油镜的使用方法。 二、基本原理 细菌体积微小，较透明，未经染色不易识别,借助于染色法可使细菌着色，与背景形成鲜明的对比，易于在显微镜下观察。 单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的方法。因细菌蛋白质等电点较低，当它生长于中性、碱性或酸性溶液中时常带负电荷，故易于与碱性染料结合，使其着色。 三、实验器材 菌种 试剂 其他器材 四、操作步骤 思 考 题 1. 你认为制备细菌染色标本时，尤其应该注意哪些环节？ 2. 为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察? 3. 如果你的涂片未经热固定，将会出现什么问题?如果加热温度过高、 时间太长，又会怎么样呢？ * 枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌 生理盐水、吕氏碱性美兰染液、齐氏复红染液 或草酸铵结晶紫染液 显微镜、酒精灯、载玻片、接种环、双层瓶、擦镜纸等 载玻片要洁净无油迹；滴生理盐水和取菌不宜过多；涂片要均匀，不宜过厚 热固定温度不宜过高（以玻片与手背接触感到不烫手为宜），否则会改变甚至破坏细胞形态 以染液刚好覆盖涂片薄膜为宜 水洗时，不要直接冲洗涂面，而应使水从载玻片的一端流下。水流不宜过急、过大，以免涂片薄膜脱落。 吸水纸吸净或吹风机吹干 涂片 干燥与固定 染色 水洗 干燥 镜检 *
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