第2章-天然药物化学成分的提取与分离 1.ppt

2）氧化铝 色谱用的氧化铝是由氢氧化铝在400～500℃灼烧而成，因制备和处理方法的差异，可分为碱性、中性和酸性3种。氧化铝是极强的亲水性吸附剂，其中又以碱性氧化铝吸附力最强,其活性也和含水量有关，含水量愈多、吸附能力愈弱。 ①碱性氧化铝（pH9～10）适于生物碱，甾醇类等碱性或中性成分的分离。碱性氧化铝有时会与醛、酮、酯和内酯类成分发生异构化、氧化和消除化反应。故不宜用于醛、酮、酯和内酯类成分的分离。 ②中性氧化铝（pH6.5～7.5），主要适用于萜、醛、酮、皂苷等中性或对酸碱不稳定的成分的分离。 ③酸性氧化铝（pH4～5）适用于有机酸、氨基酸等酸性成分以及对酸稳定的中性成分的分离。 样品与氧化铝用量比：在1:20～1:50之间，极性弱的碳氢化合物，可增至1:100～1:200。 粒度要求：柱色谱用的氧化铝，其粒度要求在100～160目之间。 市售规格：氧化铝因黏合剂或荧光剂不同可分为氧化铝或氧化铝H、氧化铝G、氧化铝HF254、氧化铝GF365等不同类型。 氧化铝、硅胶活度与含水量关系 活度等级 氧化铝（含水量%） 硅胶（含水量%） Ⅰ 0 0 Ⅱ 3 5 Ⅲ 6 15 Ⅳ 10 25 Ⅴ 15 38 3）聚酰胺 聚酰胺：又称绵纶、尼龙，是由酰胺聚合而成的一类高分子化合物。 种类较多，色谱常用聚已内酰胺（绵纶6） 难溶于水及乙醇,可溶于浓盐酸和甲酸。 其结构式为： 影响聚酰胺与被分离成分形成氢键的因素有： ①被分离成分的结构 化合物分子能形成氢键的基团（如酚羟基、羧基、醌基等）越多，则被聚酰胺吸附越强，洗脱时越难洗脱。如： 与形成氢键的基团所处位置不同，其被吸附的强度也不同。一般对位、间位酚羟基被吸附的强度要大于邻位酚羟基。 分子内芳香化程度越高、共扼双键越多,则被吸附性越强，如： 能形成分子内氢键者被吸附强度小，如： ②溶剂的种类 聚酰胺与各种成分一般在水中形成氢键缔合能力较强，在有机溶剂中较弱，在碱性溶剂中最弱。 各种溶剂在聚酰胺柱上的洗脱能力，由弱至强的顺序**为： 水 甲醇或乙醇(浓度由低至高) 丙酮 稀氢氧化钠水溶液或稀氨溶液 甲酰胺 甲基甲酰胺 尿素水溶液 (四)液滴逆流分配法 (DCCC)：是利用流动相形成液滴，通过作为固定相的液柱而达到分离纯化的目的。可有效防止乳化现象的产生。 流动相液滴垂直上下，经过固定相液体 操作技术： 装置：分为三个部分。微型泵、移动相溶液贮槽和试样液注入品组成输液部分；第二部分由300-500根内径约2mm、长度为20-40cm的萃取管连接而成；第三部分由检出器和分步自动收集仪组成。 操作：先将选择好的两相溶剂中的固定相充入全部萃取管内，然后从加样口注入已溶于（1:1）两相溶剂中的待分离试样，再由微型泵注入移动相，移动相在萃取管中形成液滴，不断地与固定相有效地接触、摩擦形成新的表面，促使演技在两相溶剂中实现充分的分配，获得很高的分离效果。不易乳化或产生泡沫，若用氮气驱动流动相，可避免被分离成分的氧化。从萃取管中流出的移动相通过检出器进行分部收集，完成液滴逆流分配的全过程。 适用范围：皂苷类化学成分的分离。 特点：使用溶剂较少，可定量回收试样，分离效果比CCD法好。 提示：广泛用于分离纯化多种天然药物化学成分，如：皂苷、生物碱、蛋白质、多肽、酸性成分及糖类等。分离效果好！ 三、沉淀法： 沉淀法：指在提取液中加入某些试剂，使某些成分产生沉淀，而其他成分可以溶解、滤过，将所需的成分沉淀出来，从而达到分离的目的。 （一）酸碱沉淀法：利用某些成分在酸、碱溶液中的溶解度不同而分离。 （含生物碱或内酯）原料 用（酸或碱）水提取 再加碱或酸（使游离或成环） 使沉淀析出（生物碱或内酯化合物） 分为：酸溶碱沉法、碱溶酸沉法 四、结晶法 结晶法：是利用混合物中各成分在某种溶剂中溶解度的差异，使某单一成分以结晶状态析出而与其他成分分离的一种方法。 1 结晶和重结晶概念 结晶：是指由非结晶状态到形成结晶的操作过程。 重结晶：指由纯度低结晶处理成纯度高结晶的操作过程。 原理：根据混合物中各成分在 某种溶剂中溶解度的差异。 先加热溶液，蒸发溶剂成饱和 溶液，此时降低热饱和溶液的 温度，溶解度随温度变化较大 的溶质就会呈晶体析出。 结晶溶剂的选择 关键 溶剂应符合下列条件： ①不与有效成分发生化学反应。 ②对欲结晶的成分在热时溶解度大，冷时溶解度小，差别越大越好。 ③对可能存在的杂质冷热时溶解度均大，这样当溶液放冷时，有效成分析出结晶，而杂质仍留在母液中；或杂质在冷热时溶解度均极小，可先滤过除去。 ④有一定的挥发性，沸点不宜过高或过低。过高时，附着于结晶表面的溶剂不易除去；过低