枯否细胞通过组织因子参与急性胰腺炎大鼠凝血系统变化的研究.DOC

枯否细胞通过组织因子参与大鼠急性胰腺炎凝血系统变化的研究 幸定培1，龚建平1＊,冯虎翼2，吴念2，吴伟1 （1 重庆医科大学附属第二医院 肝胆外科 重庆400010 ；2 重庆市第五人民医院 肝胆外科 重庆400062） [摘要]: 目的 观察大鼠急性胰腺炎组织因子（TF）及凝血系统的变化，探讨枯否细胞（KCs）通过组织因子对大鼠急性胰腺炎（AP）凝血系统的作用。方法 108只SD大鼠完全随机分为假手术（SO）组、轻症胰腺炎（MAP）组、重症胰腺炎（SAP）组、SO+Gdcl3 组、MAP+Gdcl3 组 、SAP+Gdcl3 组。Gdcl3预处理组在诱发AP模型前24h予尾静脉注射Gdcl3 (10 mg／kg，0.1 m1)，分别用1.5%和5%的牛黄胆酸钠胰胆管逆行注射诱导MAP和SAP模型。建模后或假手术组分别于术后6、12、24 h处死大鼠，检测其血清中淀粉酶及凝血项的变化;ELISA法检测血清中TF的含量；分离并培养KC s，采用Western Blot 法检测其TF的蛋白含量；免疫组化检测肝脏中TF蛋白的表达。 结果 MAP和SAP组大鼠血清中淀粉酶含量明显高于SO组（p＜0.01），与MAP+Gdcl3 组 、SAP+Gdcl3 组各相应时间点比较无显著差异。同时间点MAP组和SAP组较SO组血清中TF含量显著升高，MAP+Gdcl3 组 和SAP+Gdcl3 组较MAP组和SAP组明显降低（p＜0.05）。MAP和SAP组大鼠肝脏中TF蛋白表达较SO组表达明显增加。MAP+Gdcl3 和SAP+Gdcl3 组KC s中TF蛋白含量较MAP组和SAP组明显降低（p＜0.05）。SAP组较MAP和SO组大鼠血清凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原浓度（FIB）显著升高，SAP+Gdcl3 组较SAP明显降低（p＜0.05）。 结论 AP时KCs 中TF表达显著增加，并能导致凝血项的改变，抑制KC s可有效降低AP时TF的表达，减少凝血项的改变，从一定程度上可降低AP的发生和发展。 关键词:枯否细胞；组织因子；急性胰腺炎；凝血象 【中图分类号】R657.5.1 【文献标志码】 A 基 金 项 目 ：国家自然科学基金青年基金(基金号 作 者 简 介：第一作者：幸定培，在读研究生，医师，E-mail: 896989475@;*通讯作者：龚建平，博士后导师，主任医师，E-mail:gongjianping11@126.com Effects of Kupffer cells on acute pancreatitis coagulation function by tissue factor in rats XING Dingpei 1, GONG Jianping1＊,FENG Huyi2,WU Nian2,WU Wei1 (1.Department of Hepatobiliary Surgery, Second Affiliated Hospital of Chongqing Medical University, Chongqing 400010, China) (2.Department of Hepatobiliary Surgery, The fifth peoples hospital of Chongqing, Chongqing 400062, China ) 【Abstract】 Objective To observe the changes of tissue factor( TF) and coagulation function in rats with acute pancreatitis(AP) and explore the role of Kupffer cells (KC s) in cruor function in AP rats via TF. Methods 108 SD rats were randomly divided into sham operation (SO)group、Mild acute pancreatitis(MAP)group、Severe acute pancreatitis(SAP)group 、SO+gadolinium chloride (Gdcl3) group、MAP+Gdcl3 group 、SAP+Gdcl3 group. Gdcl3 pretreatment group were injected with Gdcl3 (10 mg／kg，0．1 m1) through the vena caudalis at 24 h before the